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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 供应商:
麦格生物
- 现货状态:
现货
- 保修期:
/
- 规格:
500个/包,8包/箱
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文献和实验液:0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF,40%(W/V)蔗糖水溶液,4℃保存。 二、方法步骤 (一) 高压灭菌 把所用的吸头、PCR管、 离心管 等用具在高压灭菌锅中121℃(约1.1 kg/cm2 )高压灭菌30 min。 (二)PCR反应物的混合 所用反应体系为:25μL反应体系中,10× PCR Buffer2.5 μL,2.0 mmol/L MgCl2 ,0.2 mmol/L dNTP,,各引物
细菌接种其中,37℃下振荡培养过夜。 2.取1.5ml培养物置于一微量离心管中,在4℃下12000rpm离心2min.,弃去上清液,使细菌沉淀尽可能干燥。 3.将细菌沉淀重悬于100μl溶液I中,剧烈振荡后加入200μl新配制的溶液II,盖紧离心管口,将其快速颠倒5次(切勿振荡),再加入150μl在冰上预冷的溶液III,盖紧离心管口,将其倒置后轻轻地振荡使溶液III在粘稠的裂解物中分散均匀,再将离心管置于冰上3~5min.。 4.在4℃下12000rpm离心
;然后以每1 mlTrizol液加入0.2 ml的比例加入氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒。 在室温下(15 ℃~30 ℃)放置2~3分钟后,12 000 g(2 ℃~8 ℃)离心15分钟; 3. 取上层水相(离心后,混合物将分离为底层为浅红的. 中层为酚-氯仿相. 上层为无色的水相。RNA包含在水相中,水相的体积约相当于所加的Trizol试剂量的60%)于一新的离心管,按每1 mlTrizol液加0.5 ml异丙醇的比例加入异丙醇,室温(15 ℃~30 ℃)放置10分钟,12 000 g(2 ℃~8 ℃
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