- ￥1049
- AXYGEN
- 美国
- MCT-150-C-CC
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
麦格生物
- 现货状态：
现货
- 保修期：
/
- 规格：
500个/包，10包/箱
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文献和实验冰上，用冰冷的 PBS 洗涤细胞。2. 吸出 PBS，然后加入冰冷的裂解缓冲液（每 107 细胞/100 mm 培养皿/150 cm2 培养瓶加入 1 ml；每 5×106 细胞/60 mm 培养皿/75 cm2 培养瓶加入 0.5 ml）。3. 用预冷的塑料细胞刮棒刮下贴壁细胞，然后轻轻地将细胞悬浮液转移至预冷的微量离心管中。4. 在 4 ℃ 下持续搅拌 30 分钟。5. 在 4 ℃ 预冷的离心机中以 16000 × g 的转速离心 20 分钟。6. 轻轻地从离心机中取出离心管，置于冰上。将上清
有针对细胞内的不同蛋白专门的蛋白裂解液试剂盒供您选择。 4.11细胞裂解操作方法： （1）培养的细胞经预冷的PBS漂洗2次，裂解液中加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂。 （2）吸净PBS，加入预冷的裂解液，（(1 ml per 107 cells/100mm dish/150cm2 flask; 0.5ml per 5x106 cells/60mm dish/75cm2 flask). （3）用细胞刮子刮取贴壁细胞，将细胞及裂解液温和地转移至预冷的微量离心管
；然后以每1 mlTrizol液加入0.2 ml的比例加入氯仿，盖紧离心管，用手剧烈摇荡离心管15秒。 在室温下（15 ℃～30 ℃）放置2～3分钟后，12 000 g（2 ℃～8 ℃）离心15分钟； 3. 取上层水相（离心后，混合物将分离为底层为浅红的. 中层为酚-氯仿相. 上层为无色的水相。RNA包含在水相中，水相的体积约相当于所加的Trizol试剂量的60%）于一新的离心管，按每1 mlTrizol液加0.5 ml异丙醇的比例加入异丙醇，室温（15 ℃～30 ℃）放置10分钟，12 000 g（2 ℃～8 ℃
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