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蛋白质免疫印迹(WB)
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广州誉嘉生物科技有限公司
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广州誉嘉生物为您提供“蛋白质免疫印迹实验服务”
简介:
Western免疫印迹,是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
原理:
Western Blot 采用的是聚 丙 烯 酰 胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,「探针」是抗体,「显色」用标记的二抗。经过 PAGE 分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
应用:
(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。
步骤:
一、试剂准备二、蛋白样品制备三、蛋白含量的测定四、SDS-PAGE电泳五、转膜六、免疫反应七、化学发光,显影,定影八、凝胶图象分析
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