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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
人细胞系
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
20
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 物种来源:
人
- 规格:
1×10^6cells
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| sh-sy5y转染突变型人神经母细胞瘤细胞 | 1×10^6cells | BJ-X946 |
公司产品仅供科研研究使用不得用于临床诊断!
1、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养
液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞
培养箱中培养;
2、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;
2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终
止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
3)用适量的冻存液(
FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序
降温盒可直接放入-80℃。
3、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结
晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;
3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2培养瓶,于 37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;

二、细胞培养操作
收货方式 :T25瓶 ,冻存管
收货处理 :观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 :细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 第二天换液并检查细胞密度
传代比例 :首次传代建议1:2传代 ,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
| 传代方法 |
| a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞贴壁情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意:1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
公司正在出售的产品:
"A498人肾癌细胞 Human renal cell carcinoma A498 cells DMEM+10%FBS 大鼠神经营养的酪酸激酶1型受体(NK1)ELISA试剂盒 TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) 小鼠坏死因子α 96T
NUP50: 核孔蛋白50抗体 IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CM-M039小鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL 大鼠神经型合酶(NOS1)ELISA试剂盒 Bcl-2 大鼠B细胞淋巴瘤因子2 96T
Nogo-A: 轴索过度生长抑制因子-A抗体 大鼠肝细胞;BRL 3A
TE671 subline No.2(人横纹肌肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H1755 [H1755](人肺癌细胞) 大鼠神经型合成酶(nNOS/NOS1)ELISA试剂盒 CXCR3 大鼠CXC趋化因子受体3 96T" "人胚胎气管组织来源细胞;CCC-HBE-2 人I型胶原蛋白(COL-1)ELISA试剂盒 Erdj5/DNAJC10 Erdj5/DNAJC10多肽 0.5mg
IFN gamma: 干扰素-γ/IFN-γ抗体 人神经胶质细胞瘤细胞;U251
SMMC-7721(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人细胞裂解液 (阳性对照) 人IκB激酶-α( IKKα)ELISA试剂盒 Tie1/JTK14 peptide 上皮生长因子样域酪酸激酶1抗原 0.5mg
IGF1R: 胰岛素样生长因子I受体抗体 腮腺细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
IL8 Protein Human 重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 标签) 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA 试剂盒 Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生长因子样域酪酸激酶2抗原 0.5mg" "RAB8B: ras癌基因家族RAB8B抗体 TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人细胞裂解液 (阳性对照)
BHK-21 [C-13] 仓鼠肾成纤维细胞 大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA 试剂盒 Beta Manase(Human Alpha mannosidase) 人β甘露糖苷酶 96T
RALB: Ras样蛋白B抗体 NIH3T3细胞,NIH SWISS小鼠胚细胞 人前列腺癌细胞,ALVA细胞 人主动脉平滑肌细胞RNAHASMC miRNA5 μg
IFNGR2 Others Mouse 小鼠 IFNGR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠白介素2可溶性受体β链(sIL-2Rβ)ELISA试剂盒 BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) 人β半乳糖苷酶 96T
Rb2 p130: 视网膜母细胞瘤相关蛋白p130抗体 人巨细胞白血病细胞株;Mo7e" "CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 试剂盒 IgG/Bio 生物素标记的兔抗人IgG 0.1ml
FGFR1OP2: FGFR1癌基因伴侣蛋白2抗体 人胚肺细胞系;KuMA
293 Ad5+细胞,人原胚肾转化细胞系 大鼠肝癌细胞,H4-ⅡE细胞 CL-0316A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2 兔子凝血酶受体()ELISA 试剂盒 IgG/Bio 生sh-sy5y转染突变型人神经母细胞瘤细胞物素标记的小鼠抗人IgG 0.1ml
FRS2: 成纤维细胞生长因子受体底物2抗体 CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人细胞裂解液 (阳性对照)
原代肾实质细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml 兔子凝血酶(TM)ELISA试剂盒 sIgA/Bio 生物素标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
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