NCI-H661[h661]人大细胞肺癌细胞

商品属性：

产品名称	规格	货号
NCI-H661[h661]人大细胞肺癌细胞	1×10^6cells	BJ-X895

  


 公司产品仅供科研研究使用不得用于临床诊断！
1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（

FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结

晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2培养瓶，于 37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；



二、细胞培养操作
收货方式 ：T25瓶 ，冻存管
收货处理 ：观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态    收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 ：细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养    第二天换液并检查细胞密度
传代比例 ：首次传代建议1：2传代 ，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿    一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。         b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞贴壁情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。         c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意：1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
公司正在出售的产品：
Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32)： 0酸化叉头蛋白家族抗体 T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人细胞裂解液 (阳性对照)
Hep G2, 人肝癌细胞系 兔子白介素1可溶性受体I (IL-1sR Ⅰ)ELISA 试剂盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgG 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321)： 0酸化叉头蛋白3A抗体 细胞名称 种属
HHpC-c 人肝细胞(HHpC) 3-6 mio. 人支气管平滑肌细胞HBSMC 兔子白介素1β (IL-1β)ELISA 试剂盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗兔IgM 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser294)： 0酸化叉头蛋白3A抗体 非洲绿猴肾细胞;CV-1
CL-0353hFOB 1.19(SV40转染人成骨细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠细胞色素C氧化酶(COX)ELISA试剂盒 E2 雌二醇 96T
MCT2： 单羧酸转运蛋白2抗体 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2
NCI-H446(人小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 COLO 205(结肠癌细胞) 大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒 ET3 游离状腺原酸T3 96T
MDH1： 可溶性苹果酸脱氢酶抗体 大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6
IL1B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA 试剂盒 ALDH  大鼠乙醛脱氢酶 96T
HPV18 E6 protein： 人类状瘤病毒18 E6单克隆抗体 CM-M026小鼠骨髓基质细胞完全培养基100mL
GNM细胞，上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌 宋氏志贺氏菌 人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0 人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA 试剂盒 HMGA2 (high mobility group A2) 高迁移率族蛋白A2抗原 0.5mg
hnRNP F： 异质核糖核蛋白F抗体 CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠骨髓瘤细胞;IR983F 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 试剂盒 HO-1/HSP32 (Hemeo xygenase 1) 血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗原 0.5mg
hnRNP K： 异质核糖核蛋白K抗体 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0909
NCI-H661[h661]人大细胞肺癌细胞P2Y8： G蛋白偶联嘌呤受体p2y8抗体 IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人细胞裂解液 (阳性对照)
人胚肾细胞;293 [HEK-293] 大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA试剂盒 Cys-C(Human Cystatin C)  人半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C 96T
P2Y9： G蛋白偶联嘌呤受体p2y9抗体 非洲绿猴肾细胞;CV-1
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI] 人前列腺成纤维细胞完全培养基 100mL 大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA 试剂盒 AChRab(Human acetylcholine receptor antibody)  人乙酰胆碱受体抗体 食管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
人脐静脉平滑肌细胞 大鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)ELISA试剂盒 5-HT(Human 5-Hydroxytryptamine)  人5羟色胺 96T