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MHCC-97H+luc人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记

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  • 邦景
  • BJ-X854
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  • 2025年07月13日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 细胞类型

      人细胞系

    • 供应商

      上海邦景

    • 库存

      20

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 是否是肿瘤细胞

    • 物种来源

    • 规格

      1×10^6cells

    产品细节图片1
    商品属性:
    产品名称 规格 货号
    MHCC-97H+luc人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记 1×10^6cells BJ-X854
    公司产品仅供科研研究使用不得用于临床诊断!
     
    产品细节图片2
     
    1、细胞传代:

    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;

    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养

    液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;

    3)弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代,最后放入 37℃,5%CO2细胞

    培养箱中培养;

    2、细胞冻存:

    1)细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 25cm2培养瓶中的培养液,用 PBS 清洗细胞一次;

    2)添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终

    止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;

    3)用适量的冻存液(

    FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;

    4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

    降温盒可直接放入-80℃。

    3、细胞复苏:

    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结

    晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;

    2)将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm 离心 5min;

    3)弃上清,沉淀用 6ml 完全培养基重悬,接种 25cm2培养瓶,于 37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;

    产品细节图片3
    产品细节图片4
    二、细胞培养操作

    收货方式 :T25瓶 ,冻存管
    收货处理 :观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态    收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
    传代密度 :细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养    第二天换液并检查细胞密度
    传代比例 :首次传代建议1:2传代 ,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿    一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
    传代方法  
    a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        
    b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞贴壁情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。        
    c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。  
    将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    产品细节图片5
    三、培养注意事项
    1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
    2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
    3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
    4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
    5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
    6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
    7. 该细胞仅供科研使用。
    8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
    9. 注意:1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
    特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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