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HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞
人细胞系
上海邦景
20
贴壁生长
是
上皮细胞样
人
肾脏,皮层,近小管
1×10^6cells
产品名称 | 规格 | 货号 |
HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞 | 1×10^6cells | BJ-X760 |
细胞名称 | HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞 |
细胞别称 | Hk-2; HK2; Human Kidney-2;人肾皮质近曲小管上皮细胞 |
种属来源 | 人 |
年龄性别 | 成年 |
组织来源 | 肾脏,皮层,近小管 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
背景简介 | HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2;Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示,HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实,HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。 |
生物安全等级 | 2 |
细胞规格 | 1×10^6cells |
支原体检测 | 无 |
基因表达情况 | alkaline phosphatase; gamma glutamyltranspeptidase; leucine aminopeptidase; acid phosphatase; cytokeratin; alpha 3, beta 1 integrin; fibronectin |
保藏机构 | ATCC; CRL-2190 BCRC; 60097;中国典型培养物保藏中心细胞库 |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
培养基 | DMEM+10%FBS+PS+5ng/ml EGF |
倍增时间 | |
STR鉴定位点 | Amelogenin: X,Y; CSF1PO: 13; D13S317: 9; D16S539: 11,12; D5S818: 12; D7S820: 10,11; THO1: 9; TPOX: 8,9; vWA: 17,18 |
传代方法 |
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞贴壁情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
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