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信帆生物
建议工作效价(*大效价):
ELISA:1:3000~15000(100000)
WB: 1:3000~15000(100000)(ECL substrates)
1: 500~1000(5000)(Chromogenic substrates)
IHC: 1: 500~1000(5000)
保存体系:10mM PBS、稳定剂、50%甘油、PH7.2
主要成分:IgG、BSA、HRP
保存:-20℃保存2年
规格: 0.1ml、0.5ml、1ml、10ml
注意事项:
1.请根据实验需要选择*适工作效价,部分实验根据具体实验情况可在推荐工作效价基础上进行增加或减小。
2.由于各实验室使用的抗体稀释液不同,稀释后酶标抗体的保存效果有所不同,故不建议在没有实验证明情况下,对抗体进行稀释后保存。
3.适当选择商业化的酶标抗体稀释保护液,有利于抗体稀释后的稳定保存。
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文献和实验我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序 1.组织切片脱蜡处理等同前; 2.流水冲洗5分钟,3%H2 O2 孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性); 3.PBS漂洗3次,每次5分钟; 4.1%牛血清白蛋白孵育,室温20分钟,移去多余液体; 5.加入PBS稀释的辣根过氧化物酶―凝集素,置湿盒内孵育。室温1.5小时; 6.PBS漂洗3次.每次5分钟; 7.呈色 DAB
钠法将SPA与辣根过氧化物酶(HRP)制成结合物,最适工作浓度以方阵法滴定;(4)热聚合人IgG:人IgG 10mg/ml,63℃加热20min制成。2、操作步骤(1)用PBS稀释SPA成5Ps/ml,包被聚苯乙烯反应板微孔,每孔0.1ml(对照孔不包被),置4℃过夜后洗涤3次备用;(2)待测血清0.05ml加PBS0.15ml和5%PEG0.2ml混匀,4℃过夜后1600r/min离心20min,弃上清,沉淀用2.5%PEG洗2次,加入PBS0.2ml和BSA缓冲液0.2ml,混匀,置37℃水浴
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