B95-8EBV 转化的绒猴白细胞

商品属性：

产品名称	规格	货号
B95-8EBV 转化的绒猴白细胞	1×10^6cells	BJ-X1165

公司产品仅供科研研究使用不得用于临床诊断！

1、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养

液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬，然后按 1:2 比例进行分瓶传代，最后放入 37℃，5%CO2细胞

培养箱中培养；

2、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时，弃 25cm2培养瓶中的培养液，用 PBS 清洗细胞一次；

2）添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终

止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至 15ml 离心管中，1000rpm 离心 5min；

3）用适量的冻存液（

FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序

降温盒可直接放入-80℃。

3、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入 37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结

晶，然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含 6ml 完全培养基的 15ml 离心管中， 1000rpm 离心 5min；

3）弃上清，沉淀用 6ml 完全培养基重悬，接种 25cm2培养瓶，于 37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；



二、细胞培养操作
B95-8EBV 转化的绒猴白细胞收货方式 ：T25瓶 ，冻存管
收货处理 ：观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h，以便稳定细胞状态    收到细胞后，需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 ：细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养    第二天换液并检查细胞密度
传代比例 ：首次传代建议1：2传代 ，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿    一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶

传代方法

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。         b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞贴壁情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。         c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞，再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min，，用新鲜的完全培养基重悬 细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞 的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注：运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议 1：2 传代 。
9. 注意：1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
公司正在出售的产品：
人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA试剂盒 SDCCAG8： 结肠癌抗原8抗体 急性T淋巴细胞白血病细胞;TALL-104 大鼠心肌细胞完全培养基 100mL
CD59 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 人细胞裂解液 (阳性对照) 小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 试剂盒 SDCG1： 血清学定义结肠癌抗原1抗体 人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17
MHCC97-L细胞，人低转移肝癌细胞 小鼠白血病细胞,P388细胞 兔肾细胞;RK-13 小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒 SDF1 beta： 基质细胞衍生因子-1抗体 CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照)
人牙龈成纤维细胞裂解物HGFL 小鼠α-内啡肽(αEP)ELISA试剂盒 SDF1： 基质细胞衍生因子1抗体 raw264.7 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 内皮细胞生长培养基套装 500ml 小鼠α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)ELISA试剂盒 SDF4： 基质细胞衍生因子4抗体 CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行细胞癌)5×106cells/瓶×2
CTLL-2(小鼠T细胞) 5×106cells/瓶×2 人结膜成纤维细胞HConF 大鼠正五聚蛋白3(PTX3)ELISA试剂盒 Chicken IgM/RBITC 罗丹明标记鸡IgM 0.3ml
Laminin 1+2： 层粘连蛋白1+2抗体 CM-M119小鼠晶状体上皮细胞完全培养基100mL
FGF2 Protein Human 重组人 bFGF / FGF2 蛋白 大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒 dog IgG/RBITC 罗丹明标记狗IgG 0.3ml
LRRC15： 富含亮酸重复蛋白15抗体 NEK3 Others Mouse 小鼠 NEK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠子宫颈上皮细胞完全培养基 100mL 大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA 试剂盒 Goat IgM/RBITC 罗丹明标记羊IgM 0.3ml
HEXIM1： 雌激素下调基因1蛋白抗体 人胚肺二倍体细胞;KMB-17
F81(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0281HELF(人胚肺成纤维细胞)5×106cells/瓶×2 犬肾细胞;MDCK(NBL-2) 人抗糖脂抗体(glycolipid)ELISA 试剂盒 GTP-CH-1 三0酸鸟苷环水解酶(抗原) 0.5mg
HEY2： 转录因子HEY2蛋白抗体 人羊膜细胞;WISH
RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 人抗糖蛋白抗体(GP)ELISA 试剂盒 H5N1-M2(Avian influenza Matrix Protein-2) H5N1流感病毒M2型(抗原) 0.5mg
LAGY： 肺癌相关蛋白Y抗体 NA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Thailand/1(KAN-1)/2004) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
B95-8EBV 转化的绒猴白细胞Proteasome 19S 10B： 蛋白酶体PRS10B抗体 293细胞，转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞 人肺腺癌细胞,GLC-82细胞 肺癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml
SIRP-BETA Others Mouse 小鼠 SIRPB1A / SIRP beta 1 人细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠激肽原1(KNG1)ELISA试剂盒 MMP-9/Gelatinase B  大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B 96T
Proteasome 26S S3： 蛋白酶体PSMD3抗体 CL-0265CAL-27(人舌鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2
AAV-293人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line AAV-293 DMEM+10%FBS 大鼠激肽原(KNG)ELISA试剂盒 ACA(Human anti-centrol and centrosome antibody)  人抗中性粒/中心体抗体 RK3 Others Human 人 kC / RK3 人细胞裂解液 (阳性对照)
人男性正常细胞;Hs68 大鼠激肽释放酶9(KLK9)ELISA试剂盒 T3(Mouse Tri-iodothyronine) 小鼠状腺原酸 96T