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信帆生物
[储存条件及有效期]
本试剂盒应置室温密封保存,有效期一年。
[所需仪器]
光学显微镜、染缸、玻片、滴管、秒表、记号笔等。
[操作步骤]
- 显色后的片子水洗 30~60 秒,滴加苏太素染色(一般动物组织为半分钟,植物组织3~5min),水洗 30~60秒:
- 滴加伊红染色 2 分钟左右,水洗 30~60 秒:
- 梯度酒精脱水干燥、透明、封片,晾干后观察(本所有无环保透明剂和封片剂供应)
胞核呈紫蓝色,胞浆呈红色,红细胞呈桔红色,其它成分呈深浅不同红色
[产品优点]
- 操作简便,染色清晰,试剂保存时间长,不易产生沉淀和金属氧化膜。
- 本染液大大缩短了操作时间时间,且封片后玻片保存时间长达 5~10 年
- 无毒、环保型试剂,对操作人员无伤害
苏木素一伊红染液(HE) 染液主要用于显示各种组织正常成分及病变的一般形态结构,是生物学、组织学、病理学及细胞学等学科必不可少的最基本的常规染色方法。在病理诊断、教学与科研中广泛应用,具有重要价值。
[检验原理]
细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料(苏木素》 亲和力较强,而细胞浆则相反,
它含有碱性物质与酸性染料(伊红)亲和力较大。因此,组织切片经 HE 染色后,细胞核被染成蓝色,细胞浆、肌纤维、胶元纤维等染成不同程度的红色,红细胞则呈橙红色。
免疫组化用苏木素-伊红染液
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文献和实验爬片,用PBS 洗涤3次。 样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。 染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。 分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。 染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。 吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。 若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。
箱、石蜡切片机、显微镜。 2. 试剂 10%福尔马林,梯度酒精(70%、80%、90%、95%),无水酒精,二甲苯,包埋石蜡,苏木素染液,伊红染液。 【实验方法与步骤】 1. 取材和固定 用锋锐的手术刀细致而迅速地取下一块大小适宜(1.5×1.5×0.2 cm)的肺组织块,立即投入10%福尔马林内固定24 h,也可多放一段时间待用时取出(最好不要超过48h)。 2. 脱水 依次经过70%(2 h)、80%(2 h)、90%(2 h)、95%酒精(Ⅰ、Ⅱ 各2 h)和无水酒精(Ⅰ、Ⅱ
一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
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