- ￥200
- 联祖
- LZ-S0175
- 国产
- 2025年09月28日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海联祖
- 库存：
38
- 检测方法：
微量法
- 规格：
100管/48样
| 产品名称 | 总巯基测试盒 |
| 规格 | 100管/48样 |
| 测试方法 | 微量法 |
| 货号 | LZ-S0175 |
商品介绍：
测定意义
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。
测定原理：
巯基基团与5,5’- 二硫代-双-甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品：
天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
注意事项：
1.阳性对照H2O2一般使用浓度为100 μM （推荐浓度50-200 μM，具体依细胞类型而定） 。通常刺激后30 min-4 h可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30 min内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果荧光信号过强，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2.实验过程中，如果阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照1:2000-1:5000 稀释荧光探针DCFH-DA，使DCFH-DA的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间可在15-60 min 内适当进行调整，尽量缩短读片时的曝光时间，并且试验组、对照组曝光时间需保持一致。
活性氧阳性对照 (H2O2) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并非所有试验组样品中都需加入活性氧阳性对照。
3.探针装载后，一定要洗净未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
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