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信帆生物
植物根系活力检测试剂盒(蔡胺微板法)
产品简介:
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影
响植物地上部的生长和营养状况以及最终产量,是植物生长的重要生理指标之一。根系能氧
化茶胺生成红色的蔡胺化合物,根系对蔡胺的氧化能力与其呼吸强度有密切联系。可以根据
根系表面着色深浅,通过定量溶液中未被氧化的蔡胺的量,以定量测定根系活力。
Leagene 植物根系活力检测试剂盒(蔡胺微板法)检测原理是在弱酸性条件下,以蔡胺为
底物,蔡胺与对氨-基苯磺酸、亚硝酸盐作用生成稳定的红色偶氮化合物,于酶标仪检测
540nm处吸光度,以吸光度变化所需茶胺进行计算,该试剂盒主要用于定量测定植物根系
活力。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
自备材料:
1、水
2、滤纸
3、离心管或试管
4、恒温箱
96孔板
6、酶标仪
操作步骤(仅供参考):
1、配制根系Assay buffer 工作液: 取适量禁胺标准(100ug/m)、根系 Assay buffer,按
禁胺标准(100ug/ml):根系 Assay buffer:蒸留水=1:1:2 混合,即为根系 Assay buffer
工作液,即配即用,不宜久置。
2、稀释标准品: 取禁胺标准溶液(100ug/ml),按下表稀释
3、准备样品:取 0.7g 植物须根系,洗净,用滤纸吸干,完全浸没于 18ml 根系 Assay buffer
工作液,室温静置 5min,取浸泡液即为待测样品。注意: 植物根系活力与培养时间.
酸碱、重金属、高温、低温等条件均有关系,在缺陷培养、碱性、重金属、高温情况下
根系活力会有不同程度的下降。
4、加样: 按照下表设置空白孔、对照孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并
注意避免产生气泡。如果样品中的根系活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进
行测定,样品的检测最好能设置 2 平行孔,求平均值
5、测定: 将系列标准孔室温静置 25min,以空白孔调零,以酶标仪测定 540nm 处系列标
准孔(1~6号)吸光度。将对照孔、测定孔室温静置 25min,以酶标仪测定540nm 处对
照孔、测定孔的吸光度(即为 A对照、 A定 ); 25C避光育 60min 后,再以酶标仪测
定540nm 处标准孔、测定孔的吸光度(即为 4对1、4定1)
计算:
以以系列标准孔(1~6 号)吸光度为纵坐标,以蔡胺浓度为横坐标,绘制蔡胺标准曲线
根据吸光度与浓度关系直接计算回归方程,根据回归方程计算出 4 对、A测定、A对照1
4测定1所对应的蔡胺浓度,即 C对 0、 C定0、C对1、 C测定1。
根系活力(ug/ml·g·h)=AC/(Wxt)
式中: AC=(C测定1-C测定)-(C对 1C对0)
W=植物须根系的重量(g)
t=孵育时间(h)=1(h)
注意事项:
1、 植物根系活力与培养时间、酸碱、重金属、高温、低温等条件均有关系,在缺陷培养
碱性、重金属、高温情况下,根系活力会有不同程度的下降,请注意实验条件尽量
保持一致,以免出现系统误差
2、磺胺酸显色液易挥发,请密闭保存,否则检测效率下降.
3、提高温度可以增加反应速度,但会降低重氮盐的稳定性,所以反应需在相同条件下进
4、如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应注意分光光度计比色杯的
最小检测体积。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作作
有效期:6个月有效
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文献和实验植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。本实验练习测定根系活力的方法,为植物营养研究提供依据。 一、原理 氯化三苯基四氮唑( TTC )是标准氧化电位为 80 mV 的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲 ( TTF ),如下式: 生成的三苯甲 ( TTF )比较稳定,不会被空气
实验原理 氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲瓒,生成的三苯甲瓒比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,所以TTC被广泛地用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原,可因加入琥珀酸,延胡索酸,苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。 实验试剂 1.乙酸乙酯(分析纯)。
【原理】根据植物矿质吸收的理论,植物对溶质的最初吸收具有吸附的特性,并假定这时在根系表面均匀地覆盖了一层被吸附物质的单分子层,因此可以根据根系对某种物质的吸附量来测定根的吸收面积。常用甲烯蓝作为被吸附物质,它的被吸附量可以根据供试液浓度的变化用比色法准确地测出。已知1mg甲烯蓝成单分子层时所占面积为1.1m2,据此即可求出根系的总吸收面积。当根系在甲烯蓝溶液中已达到吸附饱和而仍留在溶液中时,根系的活跃部分能把原来吸附的物质吸收到细胞中去,因而继续吸附甲烯蓝。从后一吸附量求出活跃吸收面积,可作
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