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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
27
- 样本:
血清,血浆或其他生物体液
- 适应物种:
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
- 应用:
酶联免疫
- 检测方法:
双抗夹心法
- 检测范围:
人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记 的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
| 产品名称 | 英文名称 | 规格 |
| 绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA试剂盒 | Sheep non-ester fatty acid,NEFA ELISA kit | 48T/96T |
标本要求:
1.绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA试剂盒标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
样品收集、处理及保存方法:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤:
1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定:
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
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文献和实验闻一闻就可以减肥?Nat Metab 研究发现食物气味竟能调节脂肪代谢
的最喜欢食物。 图片来源:Nature Metabolism 食物气味暴露导致禁食期间脂质动员 为了阐明在存在或不存在食物气味刺激的情况下小鼠的代谢变化,研究者测量了非酯化脂肪酸(NEFA)的血清水平,这是禁食期间的主要能量来源。与喂食水平相比,小鼠的基础 NEFA 水平在禁食 6 小时后轻微升高(但不显著),在 16~24 小时禁食后显著升高。在 24 小时禁食条件下,用食物气味刺激会进一步增加小鼠的 NEFA 水平。这些特征似乎是有利的,因为与饱和脂肪酸相比,不饱和脂肪酸对代谢健康有益
微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。 四、温育 温育是ELISA测定中影响测定成败最为关键的一个因素
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素敏感性,常常与TNF-α 的作用相反。1,4 它作用在肝脏和骨骼肌上,促进葡萄糖吸收,刺激脂肪酸吸收和氧化,并抑制肝糖原异生和脂肪生成。5 通常还认为脂联素通过在一定程度上抑制TNF-α 产生并拮抗TNF-α 对血管内皮细胞的影响而抑制组织炎症。5,6 在成年人中,循环的脂联素水平与脂肪组织量成反比,而血浆中HMW脂联素水平的降低与代谢综合征相关的状态有关,包括上身肥胖、血脂异常和胰岛素抵抗。1,7 R&D Systems 提供了首个ELISA 试剂盒,能够准确定量人类血清和血
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