钙调磷酸酶结合蛋白1(CABIN1)重组蛋白

蛋白样品制备中各类杂质和杂蛋白的去除

树脂结构，6% 交联的琼脂糖 ● 「笑三少」-钙调蛋白树脂 钙调蛋白树脂用于亲和纯化钙调蛋白结合蛋白（CBP），包括带有 CBP 标签的重组蛋白和真核生物中钙调蛋白调控的蛋白。树脂是 4% 的琼脂糖偶联到钙调蛋白上，配基的密度是 1 ml 树脂大约是 1 mg 钙调蛋白。 钙调蛋白树脂有单独的树脂产品形式以及试剂盒形式，试剂盒包括： 5 ml 树脂， 100 ml 钙调蛋白结合/漂洗缓冲液， (50 mM Tris-HCl (pH7.5), 200 mM

一篇搞定 IP、co-IP 实验

的，但是这结果是不是假阳性呢？还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢？考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y（co-IP）： 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白（比如，抗 X 抗体是 Mouse IgG，阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白） beads 对蛋白的非特异结合* 同上，此外还可进行 Pre clear，IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂

免疫印迹（Western Blotting）实验

印迹前常需要通过免疫沉淀，亚细胞分离等手段富集。 Western实验步骤 一、样品制备 对于Western Blotting实验而言，样品处理是关键步骤之一，获得的蛋白样品必须均质、可溶，并解离成单个多肽亚基，且尽量减少相互间的聚集，使其最终仅依赖本身的分子量大小进行分离。当目标蛋白的含量很低时，需要选取目标蛋白含量较高的组织或细胞器（如核抽提物），或者通过免疫沉淀等方式进行富集。通常样品有重组蛋白、细胞和组织等。 1. 样品收集 1）培养