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- 详细信息
- 文献和实验
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-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C (SNRPC)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide C (SNRPC)
别名:SNRP-C
种属:Homo sapiens (Human)
蛋白序列:Pro2~Arg159 (Accession # P09234)
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:P09234
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验因为短的肽标签对目标蛋白的结构影响最小,而大的亲和标签可能限制重组蛋白的折叠,影响蛋白质的生物学功能。(2)亲和标签对蛋白质稳定性的影响,亲和标签的加入是否会影响到目标蛋白的正确折叠,是促进目标蛋白的可溶性,还是容易形成包涵体,会不会造成氨基酸C和N端破坏,使目的蛋白表达不完全。(3)亲和标签所融合的位置,亲和标签可以加在N端,可以加在C端,也进行串联。多数情况下蛋白质的N端区域对蛋白质的功能不是太重要,所以在N端进行融合标签的融合常常能保留蛋白质的生物学功能。由于N端DNA序列对蛋白质的转录
重组菌的生长温度,降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法,较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用,从而可减少包涵体的形成[4]。 2、 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂,培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应,在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输,其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇(诱导热休克蛋白的表达)、低分子量的巯基或二硫化合物(影响细胞周质的还原态,从而影响
杆菌的包涵体可采用离心收获。 洗涤 包涵体常用的洗涤试剂为中性去垢剂和还原剂。包涵体中主要由重组蛋白组成,同时也含有一些外膜蛋白(Omp C、Omp F、Omp A)、16S 和 23S、5S的r RNA、质粒 DNA 和其它杂质。去除这些杂质,可采用去垢剂 Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂等对包涵体充分洗涤。包涵体洗涤的洁净程度,对于后续的纯化步骤十分重要,包涵体纯度高,可以大大降低后续的纯化压力。但是,变性剂尿素的使用应该注意的是大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 kD
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