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- 文献和实验
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-20℃保存
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant STIP1 Homology And U-Box Containing Protein 1 (STUB1)
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
50ug/50ug
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥2180.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50ug | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Recombinant STIP1 Homology And U-Box Containing Protein 1 (STUB1)
别名:CHIP; HSPABP2; NY-CO-7; SDCCAG7; UBOX1; C Terminus Of HSC70-Interacting Protein; CLL-associated antigen KW-8; E3 ubiquitin-protein ligase CHIP
种属:Mus musculus (Mouse)
蛋白序列:
标签:N-terminal His Tag
Uniprot:
表达系统:Prokaryotic expression
来源:E.coli
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文献和实验用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中,进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低,且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响,通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签,具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线,柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作,同时可以尽量避免操作过程中目标蛋白
的底物进行筛选。我们通过离体印迹磷酸化作用来确认可能的底物。总的来说,我们的方法能筛选植物蛋白激酶用于进一步的分析,随后的体内实验对评估它们的生理作用是必不可少的 [ 13,24,25 ]。2. 材料 2.1 非变性条件下重组激酶的纯化 ( 1 ) 培养细胞的培养基:含 100 μg/ml 氨苄青霉素,15 μg/ml 卡那霉素,2% 葡萄糖的 2YB 或 LB 培养基。 ( 2 ) 异丙基 β-D-硫代半乳糖苷(IPTG ) 。 ( 3 ) 非变性裂解液:300 mmol
的表达系统会造成质粒的不稳定,细胞生长速度的下降和重组蛋白产量的降低[32,33]。Lanzer和Bujard曾对常用的lac启动子-操纵子系统进行了广泛的研究,证明操纵子放在启动子序列的不同位置会造成70倍差异的抑制。将17bp的操纵子置于-10和-35六聚体区之间所形成的抑制比将其放在-35区的上游或-10区的下游要高50-70倍[34]。 启动子的第三个特性是其简便和廉价的可诱导性。大量生产蛋白质最常用的启动子是热诱导(λPL)和化学诱导(trp)启动子。异丙基硫代-β-D-半乳糖
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