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- 2025年11月25日
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杏园
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数字PCR技术服务
数字PCR（Digital PCR-dPCR）技术是一种新的核酸检测和定量方法，与传统定量PCR（qPCR）技术不同，数字PCR采用绝对定量的方式，不依赖于标准曲线和参照样本，直接计算目标序列的拷贝数。这种检测方式相比较传统的PCR技术具备以下特点：
数字PCR应用广泛
数字PCR的主要应用：
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绝对定量：标准物质的标定，没有标准品但需要定量检测的样品……
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高灵敏度的检测：痕量样品，珍稀样品，突变检测，单细胞研究……
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高精密度的检测：微小表达差异分析，拷贝数变异分析（CNV），动态监测……
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复杂样品的检测：环境样品，土壤，水样……
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NGS结果的验证，基因编辑检测……
杏园生物采用的BioRad公司的QX200，采用油包水乳化微滴技术与微流体技术，可将每份样品生成 20,000个高度均一的纳升级微滴。并且还可通过反应孔合并对高达数以百万计的微滴进行分析，实现单份样品更高的检测灵敏度，使定量分析达到一个全新的水准，即可以检测1-100,000拷贝的样品。以下是我们的实验流程：
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文献和实验而非保护不足。”水质监控的数字化在寻求建立一种更好的通过分析遗传标志来监测海岸水污染的技术方法的过程中，Cao博士及其同事调研了Bio-Rad的微滴式数字PCR (ddPCR™) 技术。这种PCR方法可将样本微滴化分割，通过对阳性微滴和阴性微滴的统计学分析获得数字化结果。Cao博士一开始就对ddPCR产生了兴趣，因为与qPCR不同的是，ddPCR不依赖标准曲线就可以获得定量结果。“我们想消除外部标准品带来的不确定性，”她说，“数字PCR的绝对定量能力可产生更具重复性的数据。”微滴式数字PCR
为什么你的 qPCR 重复性差？灵敏度低？扩增易受抑制？那是你还不知道数字 PCR
相信做 qPCR 的研友经常会碰到以下令人抓狂的时刻：三个重复的 Cqmax 和 Cqmin 能差到两个循环；提的样本中总是含有很多 PCR 抑制剂，导致 Cq 值偏大；极低丰度样本的 Cq 值总是游走在 40 和 N/A 边缘，让人崩溃；绝对定量时需要的标准品既没有商品化，自己制备起来又很费时费力……数不胜数的坑，等着有人来跳……那真的束手无策了吗？其实归结起来，qPCR 实验中碰到的难题无非是重复性差、扩增易受抑制、灵敏度低和需要标准曲线等，接下来介绍的 Digital PCR（数字
工作效率，为实验制定严格时间进度而不会受其它因素影响，科研人员将会有更多的时间和精力从事创新性的工作。海基生物可为客户提供以下分子生物学服务：大规模的核酸提取及纯化，PCR克隆及亚克隆，RT-PCR, Real-time PCR, 基因突变， 载体 构建，基因敲除, 质粒制备，SNP检测及数据分析等。凭借其丰富的生物技术服务经验，海基生物的分子生物学团队完全可以为客户解决任何技术难题。 2.上海锐赛生物技术有限公司 上海锐赛是由一群海内外从事科学技术研究和生物
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