鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
样品收集、处理及保存方法：
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验原理：
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

产品名称	英文名称	规格
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒	Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT	48T/96T

操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
公司正在出售的产品：

Anti-TNF- Alpha /Gold 胶体金离子标记坏死因子抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	通用型DNA克隆完全试剂盒(包括内切酶)10次
Anti-NF-66 α-中连蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Chickenbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA试剂盒鸡碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Anti-CXorf36/FITC 荧光素标记脱羧酶蛋白体36抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	石蜡切片组织CDK4蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
Anti-Phospho-HSL (Ser552) 0酸化荷尔蒙敏感脂肪酶抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	组织RSK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-0酸甘油醛脱氢酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	体液D-乳酸比色法定量检测试剂盒20次
Anti-FANCD2 FANCD2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	ELISAKitANG-2小鼠血管生成素2规格：48T/96T
Anti-Phospho-TAK1 (Thr184/187) 0酸化转化生长因子β活化激酶1Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISA试剂盒人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Anti-CD69/CLEC2C/AIM 活化诱导分子CD69抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	真菌/酵母细胞浆可溶性总蛋白制备试剂盒20次
Anti-MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 荧光素标记泛素蛋白连接酶抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	体液基质金属蛋白酶(MMP-7)活性荧光定量检测试剂盒20次
Anti-Phospho- Beta-Catenin (Ser675) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠0酸化β 连环素蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	ELISAKitLH小鼠促黄体激素规格：48T/96T
Anti-CD46/MCP /FITC 荧光素标记膜辅蛋白/内源性辅助因子活性蛋白抗体(人)IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	(SalmonellaTyphi)标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2次
Anti-alpha Defensin 1/3 防御素α1/3抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒重组逆转录病毒稳态表达细胞筛选试剂盒(HAT+潮霉素)10次(10毫升：10倍浓缩)
Anti-P-FADD/FITC 荧光素标记0酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	HumanLysozyme,LZMELISA试剂盒人溶菌酶(LZM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Anti-LIX1 LIX1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	组织血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)总活性荧光定量检测试剂盒20次
Anti-MAP3K8/TPL2 原活化蛋白激酶激酶8抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	Humanai-Sa-aibodyELISA试剂盒人抗Sa抗体(ai-Sa-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T