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牛胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒

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  • ¥1500 - 2200
  • 邦景
  • 人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
  • BJ023919  
  • 国产
  • 2025年07月14日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
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    • 供应商

      上海邦景

    • 库存

      24

    • 样本

      血清,血浆或其他生物体液

    • 适应物种

      人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    • 应用

      酶联免疫

    • 检测方法

      双抗夹心法

    • 检测范围

      人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1500.0
    规格:96T产品价格:¥2200.0
    实验原理:
    牛胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记 的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
    产品名称 英文名称 规格
    牛胰岛素(Insulin)ELISA试剂盒 Bovine Insulin ELISA kit 48T/96T
    产品细节图片1
    产品细节图片2
    操作步骤:
    1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
    2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
    3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
    4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
    7.温育:操作同 3。
    8.洗涤:操作同 5。
    9.显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
    10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
    计算和结果判定:
    试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
    临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
    阴性判定:样品 OD 值< 临界值(CUT OFF)者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定:样品 OD 值≥ 临界值(CUT OFF)者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
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    标本要求:
    1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
    2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
    样品收集、处理及保存方法:
    1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
    2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
    3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
    4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
    5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
     

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