小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒

标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
样品收集、处理及保存方法：
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品名称	英文名称	规格
小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒	TNFβ ELISA Kit	48T/96T

操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
公司正在出售的产品：

Anti-PH-4/FITC 荧光素标记脯氨酸水解酶4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	细胞乙酰辅酶A胆固醇乙酰转移酶(ACAT)活性荧光定量检测试剂盒20次
Anti-Nox-4/NADH NADPH氧化酶4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Human3-Niotyrosine,3-ELISA试剂盒人3-硝基酪氨酸(3-)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Anti-Clusterin- Alpha/ Beta /FITC 荧光素标记凝聚素α/β抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	石蜡切片组织衰老特异性脂褐素靛酚原位间接染色试剂盒10次
Anti-HMGA1 高迁移率族蛋白A1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	组织谷胱甘肽合成酶活性比色法定量检测试剂盒20次
Anti-ISR- Alpha /FITC(Insulin Receptor- Alpha) 荧光素标记胰岛素受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	体液非蛋白/游离巯基含量比色法定量检测试剂盒20次
Anti-Pdk4 酸脱氢酶激酶4抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	ELISAKitIgM小鼠免疫球蛋白M规格：48T/96T
Anti-Alpha-Synuclein 核突触蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	物理法石蜡切片抗原修复处理试剂盒50次
Anti-Phospho-c-Kit (Tyr703) 0酸化原癌基因c-kit抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	植物精氨酸(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次
Anti-NKA/FITC 荧光素标记神经激肽A抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	体液血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)活性比色法定量检测试剂盒20次
Anti-IKK beta /FITC 荧光素标记核因子κB激酶beta抑制剂抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	ELISAKitSOD豚鼠超氧化物歧化酶规格：48T/96T
Anti-BLNK/B-cell linker protein /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠T淋巴细胞连接蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	细胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次
Anti-Apo B 载脂蛋白B抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒线虫β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒50次
Anti-IL-16/FITC 荧光素标记白介素16抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	随机引物DNA探针同位素标记产物完全双链制备试剂盒20次
Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml	ELISAKitGH猪生长激素规格：48T/96T
Anti-S100A13 S100A13抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml	Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISA试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验原理：
小鼠肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。