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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
H1N1 (A/WSN/1933) NA expression plasmid,C-Flag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:NA
反应种属:H1N1
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
GeneBank ID:EPI242086
序列长度:1401
载体:pCMV3-C-FLAG
cDNA描述:Full length Clone DNA of Influenza A H1N1 (A/WSN/1933) NA Neuraminidase.
标签序列:FLAG Tag Sequence: GATTACAAGGATGACGACGATAAG
酶切位点:KpnI + XbaI(6kb+1.4kb)
质粒:pCMV3-H1N1-A-WSN-1933-NA-Flag
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文献和实验酶 蛋白酶表达质粒 Amp PBV220载体,42℃表达,His 纯化,蛋白酶切 ULP酶 蛋白酶表达质粒 Amp PET22b载体,25℃,0.5mM IPTG,4h表达,His纯化,蛋白酶切 HRV 3c酶(pp酶) 蛋白酶表达质粒 PET载体,30℃
把它去除干净,以便下一步试验的更好进行。 3、 溶液Ⅲ:pH4.8乙酸钾溶液(60ml 5mol/L KAc,11.5ml冰醋酸,28.5mlH2O);该溶液钾离子浓度为3mol/L,醋酸根离子浓度为5mol/L. pH4.8的乙酸钾溶液是为了把抽提液的pH调至中性,从而使变性的质粒DNA复性,且稳定存在。溶液III加入后的沉淀实际上是K+置换了SDS中的Na+形成了不溶性的PDS,而高浓度的盐有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚,使得沉淀更完全。前者是因为中和核酸
,以便下一步试验的更好进行。3、溶液Ⅲ:pH4.8乙酸钾溶液(60ml 5mol/L KAc,11.5ml冰醋酸,28.5mlH2O);该溶液钾离子浓度为3mol/L,醋酸根离子浓度为5mol/L.pH4.8的乙酸钾溶液是为了把抽提液的pH调至中性,从而使变性的质粒DNA复性,且稳定存在。溶液III加入后的沉淀实际上是K+置换了SDS中的Na+形成了不溶性的PDS,而高浓度的盐有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚,使得沉淀更完全。前者是因为中和核酸上的电荷,减少相斥力而互相
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