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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) PA expression plasmid,C-Flag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:PA
反应种属:H1N1
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
GeneBank ID:NC_002022.1(25-2175nt)
序列长度:2190
载体:pCMV3-C-FLAG
cDNA描述:Full length Clone DNA of Influenza A H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) polymerase PA
标签序列:FLAG Tag Sequence: GATTACAAGGATGACGACGATAAG
酶切位点:KpnI + XbaI(6kb+2.19kb)
质粒:pCMV3-H1N1-PR-34-HA-PA-Flag
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文献和实验His-tag 时,常遇到的问题是寄主蛋白与填料的非特异性结合,在哺乳动物重组蛋白的纯化过程中,这样的情况更为明显。由于系统中有很多含有组氨酸(histidine)的残基的蛋白,这种蛋白结构与 his-tag 相似,容易与镍柱结合,因此导致目标蛋白纯度降低[13]。FLAG-tag 系统可在非变性条件下进行纯化,能得到高纯度、有活性的蛋白,但其缺点为纯化介质较为不稳定,且纯化成本高上许多[5]。另一常用的标签为 GST-tag,一个 26kDa 的蛋白,其特点是表达量高,具高度抗原性,常用来增加目标
芥菜型油菜种皮转录组De Novo拼接及类黄酮生物合成基因的鉴定
芥菜型油菜作为一种广泛种植的作物,能产生不同颜色的种子。种子的着色是由于内皮细胞原花色素(proanthocyanidins,PA)的沉积,该终产物是通过一条类黄酮化合物合成的途径形成。为了进一步了解芥菜型油菜种子着色的基因信号网络,研究者采用Illumina/Solexa测序平台检测近交系黄籽种皮(SY)以及近等位基因系棕籽种皮(NILA)的转录组基因,对检测结果进行De Novo拼接,超过1.16亿个高质量的reads被组装成69,605个独立基因,其中以E value值为10-5为截点
),从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。MBP:MBP(麦芽糖结合蛋白)标签蛋白大小为40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBP标签可通过免疫分析很方便地检测。有必要用位点专一的蛋白酶切割标签。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。纯化:融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化。结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。结合
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