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见瓶身
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见瓶身
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/
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999
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麦格生物
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39236-46-9
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25g
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文献和实验双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色 双苯咪唑类的Hochest-33342和33258 该染料可渗透细胞 膜进入细胞内,与DNA结合,使之染色。凋亡细胞对该染料的摄取增高,染色后呈强蓝色荧光。其实验方法如下。 (1)细胞培养及凋亡的诱导:将细胞接种在10cm的培养皿中(106 细胞),在适当的时机诱导细胞凋亡。 (2)收集细胞:悬浮生长的细胞
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(dimethylpimelimide,Sigma公司)至终浓度为20mmol/L左右,室温旋转混合孵育30min后,离心去上清,加入0.2mol/L乙醇胺终止反应。继续在乙醇胺溶液中封闭2h,用PBS清洗数次,用PBS悬起来后制备2ml亲和凝胶柱。 2) 100ml IPTG诱导表达的Fab片段菌液,4℃ 4 000r/min离心15min。用pH值7.2的PBS 10ml悬起沉淀物,反复冻融三次,12 000r/min 4℃离心20min,取上清,过0.45μm滤膜,收集滤过溶液。
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