大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒

实验原理：
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

产品名称	英文名称	规格
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒	Rat proteoglycan 4,PRG4 ELISA kit	48T/96T

操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
公司正在出售的产品：
​​​​​​​

人胰腺癌细胞;PANC-1	CFD Others Human 人 CFD / Adipsin 人细胞裂解液 (阳性对照)
蛋白酶体复合物C5抗体	大鼠癌细胞;SHZ-88
转录因子E2F-5抗体	人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞;OCM-1A
草酰琥珀酸脱羧酶α抗体	CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人细胞裂解液 (阳性对照)
胞嘧啶脱氨酶抗体	HNE2, 人鼻咽癌细胞系 NIH SWISS小鼠胚细胞,NIH3T3细胞 A673(横纹肌瘤细胞)
基质金属蛋白酶28抗体	786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H091人大隐静脉内皮细胞完全培养基100mL 人脐动脉内皮细胞RNAHUAEC miRNA5 μg
细胞球蛋白抗体	PDGFRB Others Rat 大鼠 PDGFRB / PDGFR-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
桥尾蛋白抗体	NHEK.f pooled Pellet 正常人表皮角质细胞团块(少年者，混合来源) > 1 mio.cells 内皮细胞培养基ECM
芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体	人气管上皮细胞(HTEpiC)(5×105 ) MN-h, 小鼠海马神经元 Mouse
G蛋白偶联受体66/神经调节肽U受体1抗体	RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照)
耳聋常染色体显性遗传相关蛋白1抗体	IL22RA1 Others Canine 狗 IL22RA1 / IL22R 人细胞裂解液 (阳性对照)
酸化组蛋白H3抗体	大鼠蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒CL-0430RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2
9号染色体开放阅读框7抗体	CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人细胞裂解液 (阳性对照)
Kelch样蛋白24抗体	猫肾细胞;CRFK
22号染色体开放阅读框25抗体	CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人细胞裂解液 (阳性对照)

标本要求：
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
样品收集、处理及保存方法：
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。