大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

产品名称	英文名称	规格
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒	Rat Cystatin C,Cys-C ELISA Kit	48T/96T

标本要求：
1．大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
样品收集、处理及保存方法：
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
公司正在出售的产品：

LS174T细胞，人结肠癌细胞 人黑色素瘤细胞,SK37细胞 人成骨肉瘤细胞;Saos-2	CL-0465WERI-Rb-1(人视网膜神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A抗体	CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照)
梅克尔憩室综合征相关蛋白5抗体	CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
核糖体RNA合成蛋白42抗体	CL-0205Sf-9(昆虫细胞)5×106cells/瓶×2
细胞维甲酸结合蛋白2抗体	非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体	CM-R045大鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL
母细胞瘤X蛋白抗体	人脑血管平滑肌细胞总RNAHBVSMC tDNA
类状瘤病毒16抗体	人肺动脉成纤维细胞RNAHPAF miRNA5 μg
原钙粘附蛋白α9抗体	肾小球内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
丙型肝炎病毒-NS3抗体	非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B
庆大霉素单克隆抗体	人胚肺细胞系;KuMA
钾离子通道蛋白EAG1抗体	大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE) 结肠癌细胞，HCT 116细胞 M-1细胞，小鼠肾集合管细胞(SV40转化)
血管紧张素III抗体	人脑瘤细胞;SF767
钙调素调节蛋白相关蛋白抗体	草鱼肝脏细胞;L8824 人视网膜母细胞瘤，WERI-Rb-1细胞 KB(口腔表皮样癌细胞)
调亡诱导因子家族蛋白PEF1抗体	HCT 116(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2

 ​​​​​​​