手机验证
北京百奥创新科技有限公司
大量
血清,血浆或其他生物体液
体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中TNF-α浓度
Colormetric
4.69~300 pg/mL
48T;96T;96T*5
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠TNF-α抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠TNF-α会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠TNF-α抗体与结合在包被抗体上的小鼠TNF-α结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,TNF-α浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中TNF-α的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 3.5h |
反应性 | Mouse |
检测方法 | Colormetric |
检测范围 | 4.69—300 pg/mL |
灵敏度 | 2.76 pg/mL |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
(pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
---|---|---|---|
300 | 2.457 2.497 |
2.477 | 2.4 |
150 | 1.728 1.736 |
1.732 | 1.655 |
75 | 0.922 0.922 |
0.921 | 0.845 |
37.5 | 0.515 0.531 |
0.523 | 0.446 |
18.75 | 0.268 0.256 |
0.262 | 0.185 |
9.380000000000001 | 0.209 0.181 |
0.195 | 0.118 |
4.69 | 0.14 0.146 |
0.143 | 0.066 |
0 | 0.074 0.08 |
0.077 | -- |
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
Mean (pg/mL) |
15.17 | 25.68 | 115.41 | 15.93 | 24.66 | 112.05 |
Standard deviation |
0.91 | 1.09 | 3.59 | 0.93 | 1.25 | 3.56 |
C V (%) | 6.01 | 4.23 | 3.11 | 5.83 | 5.05 | 3.18 |
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
---|---|---|
Serum (n=8) | 87-100 | 92 |
EDTA plasma (n=8) | 91-109 | 99 |
Cell culture media (n=8) | 94-110 | 100 |
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
---|---|---|---|---|
1:2 | Range (%) | 99-114 | 95-109 | 97-112 |
Average (%) | 104 | 103 | 104 | |
1:4 | Range (%) | 100-113 | 98-116 | 98-113 |
Average (%) | 106 | 106 | 104 | |
1:8 | Range (%) | 102-114 | 98-114 | 97-110 |
Average (%) | 107 | 105 | 103 | |
1:16 | Range (%) | 98-113 | 93-105 | 97-109 |
Average (%) | 106 | 98 | 102 |
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
---|---|---|---|
ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃,可存放6个月 |
冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光),可存放6个月 |
标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本,37℃孵育90分钟 |
|
2. 弃掉板内液体后,立即加入100μL生物素化抗体工作液,37℃孵育60分钟 |
|
3. 弃掉板内液体,洗板3次 |
|
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液,37℃孵育30分钟,弃掉板内液体,洗板5次 |
|
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分钟左右 |
|
6. 每孔加入50μL终止液 |
|
7. 立即在450nm波长下读数,处理数据 |
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
需要更多技术资料 索取更多技术资料
E-HSEL-M0009.pdf 附 (下载 0 次)