兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒

标本要求：
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
样品收集、处理及保存方法：
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品名称	英文名称	规格
兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒	Rabbit Proteoglycan 4,PRG4 ELISA kit	48T/96T

操作步骤：
1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50µl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阴性 阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)阳性。
公司正在出售的产品：

PIEC细胞，猪髋动脉内皮细胞 人结肠癌细胞,T84细胞 CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL	正常大鼠肾细胞;NRK-52E
Human Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit 人胃肠癌标志物CA199Multi-class antibodies规格： 48T	RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人细胞裂解液 (阳性对照)
IL-14/Taxilin alpha： 白介素14抗体 0.1ml	AMBP Others Human 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人细胞裂解液 (阳性对照)
Rhesus antibody Rh GFOD2 葡萄糖果糖还原酶2抗体 规格 0.2ml	CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞亚株
IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.5ml	中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)
TM ELISA Kit 大鼠血栓调节蛋白 96T	CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL
Rhesus antibody Rh RGS2 G蛋白信号转导调节因子2抗体 规格 0.1ml	人脉络丛成纤维细胞裂解物HCPFL
Anti-TNFRSF13B/TNFRSF14B/TACI/FITC 荧光素标记坏死因子受体超家族成员13B抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	CL-0364HuT 78(人T淋巴细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
Anti-Tn-C/FITC 荧光素标记腱糖蛋白-C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	小鼠前胃癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP
PMP2： 周围神经髓鞘蛋白2抗体 0.2ml	人胚胎肺成纤维细胞;WI-38
Anti-Layilin/FITC 荧光素标记透明质酸受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	人肺癌细胞;A-427 [A427]
IFI16/p16(Human interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 人γ干扰素诱导蛋白16/p16 96T	兔子蛋白聚糖4(PRG4)ELISA试剂盒HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染，JEG-3/VP16-TNFa细胞 7F2(小鼠杂交瘤细胞)
Rhesus antibody Rh Phospho-TAK1(Thr184/187) 0酸化转化生长因子β活化激酶1 规格 0.1ml	小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B4
BP1： 肽酶A抗体 0.2ml	SK-BR-3细胞，腺癌细胞 人食管癌细胞,TE-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
Rhesus antibody Rh APM2 脂肪特定转录因子2抗体 规格 0.2ml	大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1

实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记 的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终 的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。