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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥创新科技有限公司
- 库存:
大量
- 样本:
血清,血浆或其他生物体液
- 应用:
体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中IL-1β浓度
- 检测方法:
Colormetric
- 检测范围:
7.81~500 pg/mL
- 规格:
48T;96T;96T*5
用途:该试剂盒用于体外定量检测Mouse 血清,血浆或其他生物体液中IL-1β浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IL-1β抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠IL-1β会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠IL-1β抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠IL-1β抗体与结合在包被抗体上的小鼠IL-1β结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-1β的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 48T/96T/96T*5 |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Mouse |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 7.81—500 pg/mL |
| 灵敏度 | 3.55 pg/mL |
| 样本体积 | 25μL |
| 样本类型 | 血清,血浆或其他生物体液 |
特异性:可检测样本中的小鼠IL-1β,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性:板内,板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 500 | 2.191 2.077 |
2.134 | 2.075 |
| 250 | 1.353 1.327 |
1.34 | 1.281 |
| 125 | 0.798 0.84 |
0.819 | 0.76 |
| 62.5 | 0.449 0.426 |
0.435 | 0.375 |
| 31.25 | 0.258 0.255 |
0.255 | 0.195 |
| 15.63 | 0.16 0.156 |
0.158 | 0.099 |
| 7.81 | 0.109 0.103 |
0.106 | 0.047 |
| 0 | 0.063 0.055 |
0.059 | -- |
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精密度
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) |
36.11 | 94.35 | 383.04 | 33.34 | 89.31 | 320.85 |
| Standard deviation |
1.97 | 4.45 | 18.65 | 1.70 | 4.12 | 15.72 |
| C V (%) | 5.46 | 4.72 | 4.87 | 5.11 | 4.61 | 4.90 |
回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 97-105 | 101 |
| EDTA plasma (n=8) | 96-109 | 103 |
| Cell culture media (n=8) | 88-99 | 96 |
线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 92-108 | 88-98 | 85-99 |
| Average (%) | 100 | 95 | 91 | |
| 1:4 | Range (%) | 99-109 | 89-99 | 84-95 |
| Average (%) | 102 | 92 | 91 | |
| 1:8 | Range (%) | 97-109 | 92-103 | 101-110 |
| Average (%) | 102 | 97 | 105 | |
| 1:16 | Range (%) | 89-98 | 83-97 | 83-97 |
| Average (%) | 95 | 91 | 91 |
试剂盒组成及保存
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 96T:8 孔×12 条 48T:8 孔×6 条 24T:8 孔×3 条 96T*5:5 块 96T酶标板 |
-20℃,可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 96T:2 支 48T/24T:1 支 96T*5:10 支 |
|
| 浓缩生物素化抗体(50×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 96T:1支 120μL 48T/24T:1支 60μL 96T*5:5 支 120μL |
|
| 浓缩HRP酶结合物(50×) | Concentrated HRP Conjugate | 96T:1支 120μL 48T/24T:1支 60μL 96T*5:5 支 120μL |
-20℃(避光),可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 96T/48T/24T:1瓶 20mL 96T*5:5瓶 20mL |
2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 96T/48T/24T:1瓶 14mL 96T*5:5瓶 14mL |
|
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 96T/48T/24T:1瓶 14mL 96T*5:5瓶 14mL |
|
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 96T/48T/24T:1瓶 30mL 96T*5:5瓶 30mL |
|
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 96T/48T/24T:1瓶 10mL 96T*5:5瓶 10mL |
2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 96T/48T/24T:1瓶 10mL 96T*5:5瓶 10mL |
2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 96T/48T/24T:5张 96T*5:25张 |
|
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
操作步骤
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