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MRGEC-T;MRGEC永生化小鼠肾小球内皮细胞

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  • ¥5000
  • 澳音生物
  • SAc 0586
  • 上海
  • 2025年12月18日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 品系

      小鼠

    • 细胞类型

      内皮细胞

    • 肿瘤类型

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 供应商

      上海澳音生物

    • 库存

      1×10^6

    • 英文名

      MRGEC

    • 生长状态

      贴壁细胞

    • 年限

      无限

    • 运输方式

      复苏发货或干冰冷冻发货

    • 器官来源

      小鼠

    • 是否是肿瘤细胞

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 细胞形态

      内皮样

    • 免疫类型

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 物种来源

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 相关疾病

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 组织来源

      永生化小鼠肾小球内皮细胞

    • 规格

      T25/冻存管

    细胞详情
    细胞名称 MRGEC-T永生化小鼠肾小球内皮细胞
    货    号 SAc0586
    组织来源 昆明小鼠,低于一周龄,肾小球微血管
    细胞类型 内皮细胞
    生长方式 贴壁生长
    描    述 通过给小鼠肾小球内皮细胞转染SV40建立的永生化细胞系
    培养条件 DMEM高糖,10%FBS;空气95%,二氧化碳5%37℃培养


    产品细节图片1

    产品细节图片2
    细胞操作详细步骤----贴壁细胞

    1.细胞复苏
    1.1离心法
    1.1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,一支15ml离心管,离心管中加入4-5ml细胞完全培养基。
    1.1.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
    1.1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中,1000转离心5分钟。
    1.1.4倒掉上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
    1.1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
    1.2不离心法
    1.2.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记,预热好的细胞完全培养基,培养瓶中加入8ml左右培养基。
    1.2.2取出细胞冻存管,在37度水浴中快速解冻,将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
    1.2.3将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养,接种16小时后更换培养基。
    2.细胞传代
    2.1准备细胞完全培养基,细胞培养瓶,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS
    2.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
    2.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入3-4ml完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。注意:消化时间与所用胰酶效价,消化时候细胞密度以及温度等因素有关,建议第一次消化时候,多在显微镜下观察,以找到最佳消化时间
    2.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清,加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
    2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶,补充培养基到8ml左右,十字摇晃,将细胞铺匀后放入培养箱培养。
    3.细胞冻存
    3.1准备细胞冻存液,细胞冻存管,胰酶(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA),DPBS
    3.2弃上清,并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
    3.3加入1ml胰酶,室温或者37度消化,直到细胞成片脱落,加入完全培养基终止消化,如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
    3.4收集细胞悬液,1000转离心5分钟,弃上清
    3.5加入冻存液,重悬细胞,并分装到冻存管,冻存密度0.8-1.5×106细胞/ml
    3.6将冻存管放入程序降温盒,并放到-80℃冰箱,过夜后将冻存管转移到液氮保存
    4.注意事项
    4.1不同实验室操作上会有些许差异,为了避免细胞不适应,请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养,待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
    4.2建议收到细胞后,前几代及时冻存一些细胞,并最好是可以多冻存几个批次
     

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