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-80℃
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90天
- 英文名:
pENTR223-ANAPC5-C5G
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100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pENTR223-ANAPC5-C5G
货号:KM103650
图谱:微客服
宿主:大肠杆菌
用途:基因模板
片段类型:cDNA
片段物种:人
原核抗性:Spe
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验),KAc溶液(pH4.8)(溶液 III),RNase A,95%乙醇,70%乙醇,TE buffer(pH8.0)。 5.实验准备 氨苄青霉素储存液(无菌水配制5mg/ml,分装后-20°C保存),配制LB培养基(胰化蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g加200ml ddH2O 搅拌完全溶解,用约200ml 5N NaOH调pH至7.0,加ddH2O至1L,121°C 20min灭菌);溶液I(50mmol/L葡萄糖,25mmol/L Tris HCl pH8.0,10mmol/L
Northern杂交试验指导手册-为制备RNA探针模板的DNA片断亚克隆
质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2. 反应管置于15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应物于-20℃保存备用。 注意事项 1.保证连接反应中目的DNA与质粒载体的浓度比例在3∶1,因为高浓度的DNA有利于片断与载体的连接,低浓度的DNA则会增加
的短区段,其中含有β-半乳糖苷酶基因的调控序列和N端146个氨基酸的编码信息。宿主的染色体 上带有β-半乳糖苷酶C端的编码序列。宿主和质粒 编码的片段各自都不具有酶活性,但它们可以结合为一体,形成具有酶活性的蛋白质。这样,质粒 载体与LacZ基因上缺失近操纵基因区段的β-半乳糖苷酶阴性的大肠杆菌 突变 体之间实现互补,这种现象称为α-β-D-半乳糖苷存在下形成蓝色菌落。当外源DNA片段插入到质粒的多克隆位点后,将产生无α互补
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