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-80℃
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90天
- 英文名:
pEP4 E02S EN2L
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pEP4 E02S EN2L
货号:KM103325
图谱:微客服
宿主:哺乳细胞
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:人
原核抗性:Amp
真核抗性:
荧光标记:
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文献和实验ligase 0.5μl, 混匀后用微量离心机将液体全部甩到管底,于16℃保温8-24小时。 同时做二组对照反应,其中对照组一只有质粒载体无外源DNA;对照组二只有外源DNA片段没有质粒载体。 二、 E. coli DH5α感受态细胞的制备及转化 每组连接反应混和物各取2μl转化E. coli DH5α感受态细胞。具体方法见第三章。 三、 重组质粒的筛选 1、每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀
。 同时做二组对照反应,其中对照组一只有质粒载体无外源DNA;对照组二只有外源DNA片段没有质粒载体。 二、 E. coli DH5α感受态细胞的制备及转化 每组连接反应混和物各取2μl转化E. coli DH5α感受态细胞。具体方法见第三章。 三、 重组质粒的筛选 1、每组连接反应转化原液取100μl用无菌玻棒均匀涂布于筛选培养基上,37℃下培养半小时以上,直至液体被完全吸收。 2、倒置平板于37℃继续培养12-16
片段2 [60fmol (~10ng)]C和F载体1 (60fmol)和外源插入片段3 (60fmol)D线状载体(5’-磷酸化)(60fmol)G环状载体[60fmol (~10ng)]1 载体DNA 已进行去磷酸化2 外源目的DNA 可以连接接头。3 连接反应中,质粒载体和插入的DNA 片段摩尔比一般为1:1。DNA 的总浓度应约为10ng/μl。(1)A、B和C管中加入:10×连接缓冲液 1.0μlT4噬菌体连接酶 0.5 Weiss单位5 mmol/L ATP
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