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-80℃
- 保质期:
90天
- 英文名:
pRI101-AN
- 库存:
100
- 供应商:
科淼生物
- 规格:
0.5ug/0.5ug
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 0.5ug | 产品价格: | ¥1280.0 |
英文名称:pRI101-AN
货号:KM102097
图谱:微客服
宿主:植物
用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:
原核抗性:Kan
真核抗性:Neo/G418
荧光标记:
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文献和实验类似物的瞬时表达方式。miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。microRNA过表达系统中有CMV启动子(II型启动子)和H1启动子(III型启动子)两种方式供选择。III型启动子(H1、U6等)具有表达效率高、有效的确定终止位置等优点,成为首选。II型启动子适用于pri-miRNA序列中有连续的5个T-导致III
1 . pre-miRNA 约70bp含MicroRNA 茎环结构的pre-miRNA。 制备方式:化学合成、生物转录合成、pre-miRNA质粒表达载体 、pre-miRNA病毒。 2. pri-miRNA 天然pri-miRNA 从染色体基因文库中调取300bp-1000bp完整的microRNA基因,克隆到质粒载体(普通载体或病毒载体),以强大的CMV启动子操纵该300bp-1000bp microRNA。 人工pri
, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
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