- ￥680 - 1280
- KEMOBio
- 进口/国产
- KM102599
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
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-80℃
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90天
- 英文名：
pIRESPuro3-EGFP-Linker-8×His
- 库存：
100
- 供应商：
科淼生物
- 规格：
0.5ug/0.5ug
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 0.5ug | 产品价格： | ￥1280.0 |
英文名称：pIRESPuro3-EGFP-Linker-8×His
货号：KM102599
图谱：微客服
宿主：哺乳细胞
用途：蛋白表达
片段类型：ORF
片段物种：空载体
原核抗性：Amp
真核抗性：Puro
荧光标记：绿色
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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶；小牛血清；G418；DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter；含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2，获得长4.7 kb的EBVR，包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP，克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
相关专题 4.1 实验原理 4.1.1 DNA的连接策略 质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA片段(＜10kb)且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆，从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA和目的DNA片段，然后体外使两者相连接，再用所得到重组 质粒转化细菌，即可完成。 外源DNA片段和质粒载体 的连接反应策略有以下几种： （1）互补性粘性末端的连接 单一限制
(3)平头末端的连接 是由产生平末端的限制酶或核酸外切酶消化产生，或由DNA聚合酶 补平所致。由于平端的连接效率比粘性末端要低得多，故在其连接反应中，T4 DNA连接 酶的浓度和外源DNA及载体DNA浓度均要高得多。通常还需加入低浓度的聚乙二醇(PEG 8000)以促进DNA分子凝聚成聚集体的物质以提高转化效率。特殊情况下，外源DNA分子的末端与所用的载体末端无法相互匹配，则可以在线状质粒载体末端或外源DNA片段末端接上合适的接头(linker)或衔接头(adapter)使其匹配
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