- ￥500
- Elabscience
- 15.63—1000 pg/mL
- E-EL-H0191c
- 中国
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
北京百奥创新科技有限公司
- 库存：
大量
- 应用：
体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中IL-5浓度
- 检测方法：
Colormetric
- 检测范围：
15.63—1000 pg/mL
- 规格：
48T；96T；96T*5
用途：该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中IL-5浓度
检测原理：
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IL-5抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人IL-5会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-5抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人IL-5抗体与结合在包被抗体上的人IL-5结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，IL-5浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中IL-5的浓度。
| 反应类型 | 夹心法 |
| 规格 | 96T |
| 反应时间 | 3.5h |
| 反应性 | Human |
| 检测方法 | Colormetric |
| 检测范围 | 15.63—1000 pg/mL |
| 灵敏度 | 9.38 pg/mL |
| 样本体积 | 100μL |
| 样本类型 | 血清，血浆或其他生物体液 |
特异性：可检测样本中的人IL-5，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性：板内，板间变异系数均<10%。
典型数据：
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 1000 | 2.327 2.373 |
2.35 | 2.276 |
| 500 | 1.665 1.711 |
1.688 | 1.614 |
| 250 | 0.995 0.961 |
0.978 | 0.904 |
| 125 | 0.437 0.475 |
0.456 | 0.382 |
| 62.5 | 0.286 0.276 |
0.281 | 0.207 |
| 31.25 | 0.184 0.166 |
0.175 | 0.101 |
| 15.63 | 0.12 0.132 |
0.126 | 0.052 |
| 0 | 0.074 0.074 |
0.074 | -- |
 |
精密度：
板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) |
47.22 | 99.98 | 392.09 | 49.15 | 98.65 | 419.66 |
| Standard deviation |
2.54 | 5.06 | 21.17 | 3.15 | 4.92 | 13.51 |
| C V (%) | 5.38 | 5.06 | 5.40 | 6.41 | 4.99 | 3.22 |
回收率：
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 86-101 | 93 |
| EDTA plasma (n=8) | 91-104 | 98 |
| Cell culture media (n=8) | 88-103 | 95 |
线性：
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白，做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍，4倍，8倍，16倍做回收实验，得出回收率范围及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | Cell culture media (n=5) | ||
|---|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 88-98 | 95-106 | 93-108 |
| Average (%) | 93 | 101 | 99 | |
| 1:4 | Range (%) | 90-102 | 83-97 | 85-96 |
| Average (%) | 95 | 89 | 90 | |
| 1:8 | Range (%) | 89-104 | 81-93 | 84-99 |
| Average (%) | 95 | 87 | 91 | |
| 1:16 | Range (%) | 92-107 | 83-95 | 86-100 |
| Average (%) | 99 | 88 | 92 |
试剂盒组成及保存：
未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
| 中文名称 | 英文名称 | 规格 | 保存条件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶标板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 条 | -20℃，可存放6个月 |
| 冻干标准品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 浓缩生物素化抗体(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 浓缩HRP酶结合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6个月 |
| 标准品&样品稀释液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6个月 |
| 生物素化抗体稀释液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶结合物稀释液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 浓缩洗涤液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反应终止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 张 | |
| 产品说明书 | Product Description | 1 份 | |
| 质检报告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
说明：所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些，请在使用时量取而非直接倒出。
试验所需自备物品
- 1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
- 2. 高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
- 3. 37℃恒温箱，双蒸水或去离子水
- 4. 吸水纸
操作步骤
 |
1. 对应板孔中加入100μL标准品工作液或样本，37℃孵育90分钟 |
 |
2. 弃掉板内液体后，立即加入100μL生物素化抗体工作液，37℃孵育60分钟 |
 |
3. 弃掉板内液体，洗板3次 |
 |
4. 每孔加入100μL HRP酶结合物工作液，37℃孵育30分钟，弃掉板内液体，洗板5次 |
 |
5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分钟左右 |
 |
6. 每孔加入50μL终止液 |
 |
7. 立即在450nm波长下读数，处理数据 |
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文献和实验人 白细胞介素5（IL-5） 酶联免疫 分析（ELISA） 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中 白细胞介素5（IL-5）的 含量。 实验原理 ： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 人 白细胞介素5 （ IL-5 ） 水平。用纯化的 人 白细胞介素5 （ IL-5 ） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 白细胞介素5 ，再与HRP
细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白介素3（IL-3）、白介素4（IL-4）、白介素5（IL-5）、白介素6（IL-6）及白介素8（IL-8）等的转录，而强烈地抑制细胞因子介导的炎症。也有证据表明GCS可增加mRNA的断裂而使IL-1、IL-3及GM-CSF减少。GCS也可通过抑制IL-2受体的合成，或通过将活化转录因子活化蛋白-1（activator protein-1，AP-1）等的活化调节逆转，或通过直接与AP-1相互作用，而对抗细胞因子的效应。 炎症介质，如白三烯（LT）、前列腺素（PG
研究。高度优化的ELISA检测试剂盒可以在检测标本时将干扰因素和非特异反应减少到最低水准，博士德生产的ELISA试剂盒是通过充分验证的， 敏感性：博士德的ELISA试剂盒使用标准的双抗体夹心技术，并且引进亲和素—生物素—过氧化物酶系统，以进一步提高敏感性。 稳定性：一般ELISA试剂盒所用的包被方法，很容易因干燥导致包被的抗体失去活性，从而影响结果的准确性。为此博士德进行了长期的研究，以期找到一种包被后抗体长期不失活的方法，甚至是在室温。博士德自主开发的新包被方法，正是采用了这一技术。博士
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