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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10~100
- 供应商:
科淼生物
- 检测范围:
0.156-10ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
仅供科研,不得用于临床诊断
- 适应物种:
人(Homo sapiens human)
- 标记物:
HRP
- 样本:
tissue homogenates, cell lysates or other biological fluids.
- 规格:
96T/96T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1680.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥3980.0 |
产品英文名称:Human Claudin 4 (CLDN4) ELISA Kit
别名:CPE-R; CPER; CPETR; CPETR1; WBSCR8; hCPE-R; Clostridium Perfringens Enterotoxin Receptor 1; Williams-Beuren Syndrome Chromosomal Region 8 Protein
种属:人(Homo sapiens human)
样本类型:tissue homogenates, cell lysates or other biological fluids.
检测范围:0.156-10ng/mL
灵敏度:0.057ng/mL
检测方法:sandwich
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文献和实验一、原理 植物激素(planthormone)免疫定量主要有放射免疫分析(RIA)和酶联吸附免疫分析(ELISA),由于前者操作上欠安全等原因,目前常采用后一种类型。在ELISA中,抗原抗体反应的检测依靠酶标记物来实现,常用的酶有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酯酶。酶可直接标记激素分子,称为酶标植物激素,也可标记于第二抗体(识别抗激素抗体Fc片段的抗体或金黄色葡萄球菌A蛋白),称为酶标二抗。这两类标记物分别用于固相
。 聊完以上那些浅显的基本常识,接下来谈我认为最麻烦的: 首先,抗原抗体识别原理的物理学解释,抗体孵育过程实际上就是一个竞争结合的动力学过程。由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万——数十 亿倍,所以当特异性抗体与非特异性‘抗体’(不好描述,指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白,我们可以把它们看成非特异性的一抗)竞争时,尽管抗体稀释液中封 闭蛋白的浓度是一抗浓度20K:1以上,在碰撞几率相同的条件下,由于时间的积累加孵育过程中反复漂洗(孵育抗体要摇晃,对吧),特异性一抗积累了识别
过高,如何解决? 应该是多因素引起的:封闭不完全、显色过度、洗涤不充分、转移缓冲液或设备有污染、抗体稀释度不对或抗体不纯。 封闭不完全:一抗或二抗只要结合到膜上,就会显色。为了避免非特异性的结合,应用封闭液孵育膜,使所有的空白位点都被封闭蛋白占有。NC膜推荐的封闭液是3%的明胶。在室温孵育1小时。明胶不能再4℃孵育,因为会凝结。如果想在低温封闭的话,可以用3%的BSA 。PVDF膜推荐的封闭液是5%的脱脂奶粉。脱脂奶粉不能与Bio-Rad生物素化的蛋白标准一起使用。脱脂奶粉浓度
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