- ￥3490
- gelatins
- JC-E4494
- 国内
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
猪内源性逆转录病毒RT-PCR试剂盒
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
避光/低温保存
- 规格：
50次
产品及特点：
内源性逆转录病毒是嵌在细胞内基因组的病毒，在猪身体里不会有毒性。异种病毒传播最典型的例子就是艾滋病病毒从灵长类动物传播到人类。因此，内源性逆转录病毒成为人体移植利用猪器官面临的一个重大医疗风险问题。本产品根据 PCR 原理开发，可用于科研领域快速检测猪内源性逆转录病毒。
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据猪内源性逆转录病毒的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到1000拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够50次20μL体系的RT-PCR。
6. 本产品由江蓝纯生物提供，不得用于临床诊断。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 5×双酶一管式 RT-PCR Buffer | 200 μL（橘黄盖） |
| 试剂二 | MMLV-Taq Mix | 75 μL（红盖) |
| 试剂三 | 超纯水 | 1 mL（亮黄盖） |
| 试剂四 | 猪内源性逆转录病毒RT-PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂五 | 猪内源性逆转录病毒RT-PCR阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂六 | 使用手册 | 1 份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为 12 个月。收到货后阳性对照需要跟其他成分分开放置，因为其容易污染其他成分，造成假阳性。
自备试剂：
样品 RNA。
猪内源性逆转录病毒RT-PCR试剂盒
使用方法：
一、样品 RNA 的制备：
1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL 猪内源性逆转录病毒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液作为制备的阳性对照。可以用水作为制备的阴性对照。制备所得成为样品 RNA。
2. 用自选方法纯化N+2个样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。可以选购本公司的柱式病毒RNAout。
二、设置 RT-PCR 反应（20μL 体系）：
3.如果有N+2个样品，则标记N+4个PCR管（额外增加的两个管一个是RT-PCR阳
性对照，另一个是RT-PCR 阴性对照）并按照下表在PCR管中加入下列成分：
| 成份 | N+2 个 样品管 |
RT-PCR 阴性对照 |
RT-PCR 阳性对照 |
| 5×双酶一管式RT-PCR Buffer | 各 4 μL | 4 μL | 4 μL |
| 猪内源性逆转录病毒RT-PCR引物混合液 | 各 2 μL | 2μL | 2μL |
| N+2个制备的 RNA 样品 | 各 12.5μL | -- | -- |
| 超纯水 | -- | 12.5μL | -- |
| 猪内源性逆转录病毒RT-PCR阳性对照的1000倍稀释液 | -- | -- | 12.5μL |
| MMLV-Taq Mix | 1.5 μL | 1.5 μL | 1.5 μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 42℃ | 30 min |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR反应(35个循环） | 95℃ | 30 sec |
| 58℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 20 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 琼脂糖电泳检测扩增效果。如果阴性对照有扩增产物或阳性对照无扩增产物，则说明实验失败，需要分析实验失败的原因。只有在阴性对照没有扩增产物、阳性对照必须有预期条带出现，才有必要分析样品的实验结果，如果有预期片段大小的扩增产物则为阳性，如果无则为阴性。
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文献和实验我要扩增一种逆转录病毒（)的某段基因。将这段基因用RT-PCR方法扩出来后，再用pcDNA3.1转到Hela细胞中，观察它对细胞一些表达产物具有正向还是负相的调节作用。基因序列如下： 1 atggaacaag ccccagaaga ccaagggcca cagagggagc cacacaatga atggacacta 61 gagcttttag aggagcttaa gaatgaagct gttagacatt ttcctaggat ttggctccat 121
的转基因微型猪，这些微型猪被设计成人类疾病模型。尽管微型猪仍然是一种有益的医学模式，但对BGI来说，却是另一种有趣的商业机会：该研究所今年早些时候宣布，这些动物也将作为宠物出售。在猪身上的应用仍然是基因组编辑发展议程上的重要议题；而且有一个很好的理由：猪是许多人类疾病的有价值的模型，而且它们的生理学与人类有些相似，它们的器官大小刚好合适——它们仍然是异种移植的最佳候选对象。然而，利用猪器官进行移植的努力长期以来一直受到似乎无法解决的人猪差异的阻碍：危险物种特异性内源性逆转录病毒的存在。不过，就在上个
。临床诊断的品种如HBV/HCV及禽流感诊断试剂盒性能优良、供应充足，基本实现国产化。在猪流感病毒RNA核酸序列明确的情况下，利用现有的试剂研发平台，人感染猪流感实时荧光定量PCR诊断试剂盒很快就会面世。实时荧光定量PCR技术在猪流感诊断中的作用已有法规确立在人感染猪流感病毒出现以前，针对猪与猪传染的传统猪流感疫情，近年来我国科技人员经过不懈努力，探索快速检测与诊断方法].人感染猪流感疫情发生后，美国疾病预防控制中心（CDC）于2009年4月28日发布了针对人感染猪流感病毒治疗和预防临时指南
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