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- xuanya
- XY-PCR5872
- 国产
- 2025年09月30日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10
- 英文名：
Dicrocoelium dentriticum
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
产品名称：枪状肝吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Dicrocoelium dentriticum
产品规格：50T
保存及有效期：请于-20℃条件下保存，有效期 12 个月。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：样品模板
产品特点：
1. 一站式，用户不需要单独准备每种成分，包括引物和对照。
2. 根据产品相关的保守基因序列设计的引物，具有良好的特异性。
3. 灵敏度可以达到 1000 拷贝/反应。
4. 使用一管式 RT-PCR 技术，RT 和 PCR 两步在一个试管内完成，不需要中间 转移样品，降低了操作误差和可能的污染。
5. 本产品足够 50 次 20μL 体系的 RT-PCR。
6. 本产品只能用于科研，不能用于临床。
枪状肝吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒包装规格及成分（具体信息详见说明/书）：
| 编号 |
成分 |
规格 |
| 试剂一 |
PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 |
超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 |
引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 |
阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |
| 说明/书 |
使用手册 | 1 份 |
枪状肝吸虫探针法荧光定量PCR试剂盒注意事项：
1.所有操作严格按照说明/书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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所特有的，下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率，把引物二聚体调整到越小越好；探针法则需要设计荧光探针，这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个：完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上；这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置，根据自己试验情况而定，本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。 1. 将组织在液N中磨成粉末后，再以50-100 mg组织加入1 ml Trizol液研磨，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10×106个细胞加1 ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30 ℃下放置5分钟
