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- 爱必信(absin)
- abs60559
- 上海
- 2025年07月11日
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- 详细信息
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- 技术资料
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现货
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- 保质期：
规定储存条件下12个月 。
- 供应商：
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 保存条件：
规定储存条件下12个月 。
- 规格：
100T×4
| 概述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | 宿主细胞残留DNA可能会传递肿瘤或病毒相关基因，存在潜在的危险性，各国药品监督管理机构都对其残留量有着严格的限度控制，我国药监局于2022年5月试行的《体内基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》中明确指出“要对DNA残留量和残留片段的大小进行控制，建议尽量将残留 DNA 控制在10ng/剂内，DNA 残留片段的大小控制在 200bp以内“。各国药典也陆续提供数种关于宿主细胞残留DNA检测经典的方法，目前以实时定量聚合酶链式反应（qPCR）方法较好。 爱必信的多款残留DNA片段分析试剂盒能快速、特异地检测多种宿主细胞（Human，Hela，293系列的HEK293、293T等）DNA残留片段大小分布。片段分布区间包括：<100bp，100~200bp，200~500bp，>500bp。该试剂盒配套宿主残留DNA样本前处理试剂盒使用。 本试剂盒利用TaqMan荧光探针原理，设计了四种不同的扩增片段（94bp，153bp，232bp，526bp）来定量检测分析样品中Human残留DNA片段含量情况。检测快速，专一性强，最低检测限可以达到fg水平。 试剂盒配套有HumanDNA定量参考品可准确定量Human残留DNA片段含量。试剂盒的检测范围为：0.03pg/μL~300pg/μL。 产品特点： 稳定性高：受环境影响较小，保质期内性能稳定； 精密度高：低浓度重复性CV值<20%;中高浓度重复性CV值<15%； 专属性强：不受CHO E.coli 的外源DNA干扰； 快速便捷：qPCR 1小时即可出结果。 |
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| 产品组成 |
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| 用途说明 | Human残留DNA片段检测试剂盒用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中Human残留DNA片段含量的专用试剂盒。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用方法 | 一、试验所需自备器材： 荧光定量PCR仪 1.5mL无菌低吸附离心管 无菌无酶八联管或96孔qPCR板 1000μL，100μL，10μL移液枪 1000μL，100μL，10μL无菌低吸附带滤芯吸头 二、适配机型（包括但不限于）： LightCycler480Real-TimePCRSystem ABI7500Real-TimePCRSystem Bio-RadCFXOpus96Real-TimePCRSystem 三、试验流程： 1、Human DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备 用试剂盒提供的DNA稀释液将Human DNA定量参考品（30ng/μL）进行梯度稀释，稀释浓度依次为3000pg/μL，300pg/μL，30pg/μL，3pg/μL，0.3pg/μL，0.03pg/μL。具体步骤如下： （1）将试剂盒中的Human DNA定量参考品和DNA稀释液置于冰上或2-8℃条件下融化。待完全融化后，轻微振荡混匀，短时间快速离心3~5s，如此重复3次。 （2）取6支干净的1.5mL离心管，分别标记为ST0，ST1，ST2，ST3，ST4，ST5。 （3）在ST0管中用DNA稀释液将DNA定量参考品稀释至3000pg/μL，轻微振荡混匀，短时间快速离心3~5s，如此重复3次，确保DNA定量参考品与DNA稀释液充分混匀，使用时避免反复冻融。 （4）在ST1，ST2，ST3，ST4，ST5管中分别加入180μLDNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方式如表2所示： 表2 Human DNA定量参考品的稀释
2、qPCR反应液的制备和加样 注：片段试剂盒中含有四种不同长度的扩增片段，在建立标曲时，需分别对不同的扩增片段设置标曲，并根据对应扩增片段的标曲来计算其残留量。 （1）根据所需检测的参考品和待测样品数量（一般做3组复孔），分别计算各片段反应所需孔数： 反应孔数=（参考品ST1-5+1个无模板对照NTC+待测样品）×3 （2）根据反应孔数计算各片段本次所需的Human qPCRMIX总量： Human qPCRMIX=（反应孔数+2或3）×20μL（2或3为操作损失量） （3）将所用试剂置于冰上融化，轻微振荡混匀，按表3、4、5、6所示配制对应扩增片段Human qPCRMIX。
（4）将所需试剂置于冰上融化，轻微振荡混匀，按表7、8、9、10所示加样：
表11表示的是检测各浓度梯度的DNA标准曲线、1个无模板对照NTC。每个检测做3个重复孔。其中1~3列为MIX-94bp，4~6列为MIX-153bp，7~9列为MIX-232bp，10~12列为MIX-526bp。 表 11 96 孔板排版 示例
（5）试验可使用无菌无核酸酶的八联管或者96孔板进行反应，需去除反应体系中的气泡，并离心至管底准备反应。
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| 性能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 储存/保存方法 | 规定储存条件下12个月 。 |
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| 注意事项 | 1、本试剂盒已通过稳定性（冻融等因素）的验证，无需分装。 2、阴性样品(2×qPCRReactionMIX、Human Primer&ProbeMIX和DNA稀释液等)和阳性样品(参考品和待测样品等)的配制环境需区分区域，不可在一个区域内操作，配制人员需穿戴整齐，戴好口罩、手套和穿好洁净服。 3、注意在不同加样步骤间及时更换吸头，避免交叉污染，避免长时开盖。 4、试剂盒必须在有效期内使用。 5、试剂盒内所有组分建议在低温环境融化后使用。 6、只有严格遵守说明书的操作方法，全部使用本试剂盒配套的试剂才能保证最佳检测效果。 7、最终的试验结果与试剂的有效性、操作者的操作方法及试验环境密切相关。 8、公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。 |
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文献和实验装备很重要：做出心中的梦中情图，最基本的一步就是拥有一把好用的移液枪，保证其量程是准确的，且每次做 RT-qPCR 的时候要固定使用那一把移液枪，避免造成因枪的不同带来的误差。 保证 RNA 质量：A260/A280要在 2 左右；不同组的样品 cDNA 的浓度也要一致，只有这样你所要扩增的模板的基线才是一致的，后续出来的 CT 值才有参考意义。 反复确认引物种属：很多刚接触实验的小白们，拿着 human 的引物在鼠样本上做 RT-qPCR，，也许跑到天荒地老这个结果也无法得到，既浪费
快速解酒，还可减轻酒精伤害！中国团队开发的重组益生菌，或成为新型「解酒神器」
摄入后的恢复时间。 图 4 口服益生菌减少了醉酒小鼠的运动恢复时间（来源：[2]） 三、口服益生菌可帮助小鼠减轻与急性饮酒相关的肝肠病变 为了测试不同益生菌对酒精吸收的影响，研究使用乙醇检测试剂盒测量饮酒后血液内的酒精水平。 在最初的一个小时里，两组小鼠血液中的酒精含量没有差异。两小时后，对照组的血清酒精残留物继续增加，而 hADH1B 组的血清酒精残留物则呈显著下降趋势，明显低于对照组。经检查后发现，hADH1B 治疗降低了血液中甘油三酯的浓度并降低了小鼠肝脏中的脂质水平（图
）。这些结果表明：虽然瞬时表达的 IDLV-CRISPR/Cas9 也能诱导脱靶突变，但其脱靶率显著低于 LV-CRISPR/Cas9。如果想实现高精准度的基因编辑，IDLV-CRISPR/Cas9 是一个不错的选择。 IDLV 介导基因组无痕编辑 改变生物体的遗传密码以产生某些理想的结果是基因工程的目标，基因编辑包含三大技术：锌指核酸酶（ZFN）、转录激活因子样效应核酸酶（TALEN）、CRISPR/Cas9；使用 IDLV 递送这些组分可以实现无编辑工具基因组的痕迹残留，从而减少对原始细胞表型和活力
