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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
深圳子科生物科技有限公司
- 库存:
50
- 样本:
人血清 血浆 组织样本等
- 适应物种:
人
- 应用:
科研实验
- 检测方法:
ELISA方法
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1、酶标仪(450nm)
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3、37℃恒温箱
操作注意事项
1、试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2、 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3、浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5、 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验(见图5、6)。以往常有草率的解释,认为某些肽段的离子强度相对于正常人偏高或偏低是由于原始蛋白上调或下调所致,本文的观察结果直接反驳了这一论点,很显然,HMW-缓激肽的水平不可能同时既上调又下调。 多肽2724(见图5)是来自交联-α-胰蛋白酶抑制物重链(ITIH4)前体[43]包括第662–687位氨基酸(补充表3、4),由于含两个激肽释放酶酶切位点(Phe-Arg–Xaa)而得名。第662–687位氨基酸残基似乎是一种功能未知的前肽[44],与缓激肽相似,末端
用张龙翔书里的办法,先提卵类粘蛋白,首先过SEPHADEX G-25 柱子脱盐,然后过DEAE纤维素离子交换柱;第二步是用卵类粘蛋白合成SEPHAROSE-4B亲和柱。这些层析过程都可以在缓冲液里面加0.02%的叠氮化钠抑菌吗?以后怎样去除? 我提胰蛋白酶粗酶用的乙醇,可以用异丙醇或正丁醇或其它的低分子醇吗?浓度多大为好? 那实验我知道,你用什么方法活化琼脂糖呢,胰蛋酶的亲和纯化方法很多,配基有大豆胰蛋白酶抑制剂,抑肽酶,苯甲脒类,特别是后面的苯甲脒,可以买到现成的苯甲脒琼脂糖凝胶,何必自己去提取
液里面加0.02%的叠氮化钠抑菌吗?以后怎样去除? 我提胰蛋白酶粗酶用的乙醇,可以用异丙醇或正丁醇或其它的低分子醇吗?浓度多大为好? 那实验我知道,你用什么方法活化琼脂糖呢,胰蛋酶的亲和纯化方法很多,配基有大豆胰蛋白酶抑制剂,抑肽酶,苯甲脒类,特别是后面的苯甲脒,可以买到现成的苯甲脒琼脂糖凝胶,何必自己去提取呢,感觉比较复杂,自己偶联这些配基也可以,层析过程不需要加0.02%的叠氮化钠抑菌,尽量不要加,那透析或者除盐柱子都可以,或者直接上一样的亲和柱子,用不含这个的缓冲液洗,最后洗脱
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