荧光素-二-β-D-葡糖苷酸

增进RNAi分析的强大工具

2）。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到＞80％的靶定基因阻断 经Dicer酶切的，来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA（d-siRNA）库，用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc，分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子，或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子

糖醛酸 uronic acid

葡萄糖的酶促氧化反应中生成的 UDP葡糖醛酸（ UDP glucuronic acid）作为前体，在特异的转移酶的催化下 D-葡糖醛酸残基转移到糖苷配基或其它糖链的非还原性末端，形成糖醛酸苷键。认为 D-半乳糖醛酸、 D-甘露糖醛酸、 L-艾杜糖醛酸等是在核苷酸糖的阶段或多糖链阶段，由差向异构酶的反应形成的，但实验证据不一定充足。另一方面，在生物体内也广泛分布着特异的水解糖醛酸苷键的酶（β -葡糖苷酸酶）。  

常见的报告基因

范围较窄，灵敏性较低。     (2)β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码，可催化半乳糖苷水解。最大优势是易于用免疫组织化学法观测其原位表达，是最常用的监测转染率的报道基因之一。以邻―硝基苯―β―D―半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物可用标准的比色法检测酶活性，其检测动力学范围为6个数量级。氯酚红―β―D―半乳吡喃糖苷(CPRG)是另一个可用比色法检测酶活性的底物，其灵敏度比ONPG高近10倍。以MUG和荧光素二半乳糖苷(FDG)为底物则可用荧光法检测其活性。此法可检测单个