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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
羽扇豆源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据羽扇豆源性成分保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。

规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 羽扇豆源性成分染料法PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 羽扇豆源性成分染料法PCR 阳性对 照(1×10E8 拷贝/μL) |
50 μL(红盖) |
| 试剂五 | DNA 病毒裂解液(试用装) | 15 次(9 mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:
DNA 模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
样品 DNA 的制备:
如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 上步制备的 PCR 阳性对照的第 4号(浓度为 1×10E4 拷贝/μL,10μL 相当于 1 万拷贝)或第 5 号(浓度为 1×10E5拷贝/μL,10μL 相当于 10 万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。如果每次制备需要 200μL 样品,则 PC 和 NC 的体积也必须是 200μL。
用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 15 次一管式病毒 DNAout。
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文献和实验酶消化→原位PCR扩增→冲洗→产物检测优点:灵敏度高,可进行细胞内定位。 八、荧光定量PCR(FQ-PCR) 荧光定量PCR:融汇PCR技术、DNA探针杂交技术(标记有荧光报告基团和荧光淬灭基团),结合先进的光谱检测技术发展起来的一项新技术。 主要原理是在待扩增区域结合上DNA探针,PCR过程中,具有5’→3’外切酶活性的Taq酶延伸引物链到DNA探针时,将DNA探针逐个降解,释放出荧光报告基团,这样PCR体系中荧光的强度与PCR产物量之间存在正比关系,可通过测定荧光强度而对PCR产物定量
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
ginseng)和西洋参(Panax quinquefolius)及其5种伪品沙参、蔓生百部、桔梗、紫茉莉、商陆通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)图谱可以达到鉴别目的。但是蛋白质电泳图谱类型主要是依靠肉眼直观比较,人为区分的,在一定的程度上影响了结果的准确性。1.3 同工酶 特点是同工酶的变异非常丰富,结构的差异直接来源于基因的差异,并能够稳定遗传。因此,用它可以鉴别许多从外部形态上难以区分的遗传变异。其次,由于同工酶分析系采用酶活性染色和电泳检测,非酶类成分不被显示,电泳图谱往往比蛋白质电泳图谱简洁、清晰
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