O0600 麦格 SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

1. 前言 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS) 已经被广泛应用于生 物科学中。结合十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE ) 和酶解消化，它提供了一种通过肽质量指纹谱（PMF ) 的快速、灵敏和准确鉴定蛋白质的方法通常 PMF 给出 10%~40% 的序列覆盖率。这样的覆盖率对于蛋白质鉴定来说已经足够，但它可能还不足以用来区分高度相似的蛋白质异构体。蛋白质异构体/同工酶广泛存在，它们通过 mRNA 的可变剪切或多基因家族生成。虽然它们在细胞中催化

蛋白质翻译后修饰（PTMs)概述

or mass spectrometry.图示：S-亚硝基化 Weste Blot 试剂盒标记和检测 S-亚硝基化的反应。样品首先与 MMTS 反应，封闭 S-亚硝基化蛋白质中的游离巯基。然后用抗坏血酸盐选择性还原 snitroscysteine，并用 Thermo Scientific iodotmt zero 标记试剂进行标记。随后，使用提供的抗 TMT 抗体在免疫印迹中检测 TMT 标记蛋白。5、Methylation：一碳甲基转移至氮或氧（分别为 N-和 O-甲基化）至氨基酸侧链，增加了蛋白质的疏水

紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取

的大规模的蛋白质组的成果相对比较新。本章简单总结现有细胞壁蛋白质提取方法并且描述一种从紫花苜蓿茎中提取细胞壁蛋白质的具体方法。 提取细胞壁蛋白质最古老和温和的方法可能包括在适当的溶液悬浮或者洗涤直接从完整的培养细胞提取。史密斯等 [1] 把番茄的悬浮细胞用 CaCl2 浓度梯度洗涤出伸展蛋白的前体流入小柱子。Scott 和 O'Neil [2] 从胡萝卜悬浮细胞中通过用不同浓度的含有 CaCl2、Triton X-100 和 0.1 mol/L LiCl 的溶液提取胞外