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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见瓶身
- 保质期:
见瓶身
- 英文名:
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
- 库存:
现货
- 供应商:
麦飞生物
- CAS号:
无
- 规格:
10ml
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文献和实验. ( 3 ) l× 凝胶电泳 加样缓冲液: 50 mmol / L Tris -CI ( pH 6 . 8 ) 50 mmol / L DTT 2 % SDS (电泳级) 0.1 % 溴酚蓝 10 % 甘油 2、大肠杆菌包涵体的分离与蛋白纯化 材料: 1 )酶溶法 (1)裂解缓冲液: 50 mmol / L Tris-CI ( pH 8 . 0 ) 1 mmol / L EDTA 100 mmol
大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
4) 将湿菌体悬浮于20毫升0 o C预冷的破菌缓冲液(50 mM磷酸钾缓冲液,pH6.8,含10 mM巯基乙醇,2 mM PMSF,10%甘油)中,冰浴超声波破菌。 5) 将破菌液于4o C,12,000g离心30分钟后继续经4 o C, 150,000g超离心1小时。 6) 取上清液经过DEAE-SepharoseTM Fast Flow和HA-Ultrogel两步柱层析纯化。在DEAE-Sephorose CL-6B fast flow纯化中使用的线性洗脱梯度
个细胞。考虑到我们后续还要对酶切用量进行优化,实际准备了足量细胞(每组约 1.5×107 个细胞)。在我们实验前,我们仔细观察了细胞的状态和密度,细胞状态很健康,贴壁良好,也达到了 80% 左右的汇合率,一切都符合 ChIP 实验的要求。拿出试剂盒,我们首先对各种标配试剂置于冰浴中进行了标记。由于试剂盒标配的 DTT 为干粉,因此我们需要配制 1M DTT 溶液(具体地,192.8 mg DTT#7016 加 1.12 ml dH2O,确保 DTT 完全溶解)。然后,我们取出并室温预热 200
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