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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见瓶身
- 保质期:
见瓶身
- 英文名:
Western一抗稀释液
- 库存:
现货
- 供应商:
麦格生物
- CAS号:
无
- 规格:
100 mL/10mL
| 规格: | 100 mL | 产品价格: | ¥200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10mL | 产品价格: | ¥30.0 |
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文献和实验蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
流速。所以在结合前先通过预过滤或离心除去颗粒,只将上清加到膜上。而粘性样品要用缓冲液稀释。 Western印迹 Western印迹含一系列步骤,包括: z 用聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白样品。 z 将胶上的蛋白转移到膜上。 z 鉴定膜上特定蛋白。 下面将从理论和实践方面讨论Western印迹方法。 用1-D或2-D凝胶分离复杂蛋白质混合物 印迹前分离复杂蛋白质混合物的最常见方法是一维(1-D)SDS-PAGE电泳,它根据蛋白质的分子量进行分离。有时用非
μg/cm2。 就温度适应性而言:尼龙膜经烘烤或紫外线照射后,核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合;硝酸纤维素膜依靠疏水性相互作用结合DNA,结合不牢固;PVDF膜结合牢固,耐高温,特别适合于蛋白印迹。 就韧性而言:尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆,易破碎;PVDF膜较强。 就重复性而言:尼龙膜可反复用于分子杂交,杂交后,探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。 Y. 在做Western Blot时,PBDF膜用甲醇浸泡的目的? 解答
固;PVDF膜结合牢固,耐高温,特别适合于蛋白印迹。就韧性而言:尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆,易破碎;PVDF膜较强。就重复性而言:尼龙膜可反复用于分子杂交,杂交后,探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。Y. 在做Western Blot时,PBDF膜用甲醇浸泡的目的?解答:PVDF膜用甲醇泡的目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团,使它更容易跟带负电的蛋白质结合,做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目的。Z. 检测磷酸化的JNK 和非磷酸化的JNK可以在同一
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