产品简介:
快速转膜液使用独特配方,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF 膜或 NC 膜)上。
使用湿转法(Tank blot)或半干转法(Semi-dry blot)方法,能在10-40 min 完成转膜过程。
快速和环保:快速转膜液不使用甲醇,减轻了对实验者和环境的伤害。
兼容性好:快速转膜液能兼容 Laemmli 胶,预制胶,Bis-Tris 胶等多种凝胶。
转移效率高:快速转膜液对分子量跨度较大的蛋白也有很好的转移效率,有效解决了大
小蛋白不能在同一张膜上同时转移的问题。
使用说明:
转膜前的准备:
裁好的滤纸;裁好的转印膜;1×快速转膜液;无水甲醇(处理PVDF膜用);无水乙醇
一、湿转法(Tank blot):
1、按照下表配制 1×快速转膜液:
2、将滤纸和海绵浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿,平衡 5 分钟。
3、 PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿 30 秒,随后浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿平衡
5 分钟。
4、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗 2 分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在 1×快速
转膜液中。
注:水中漂洗时间一定不能超过 2 分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
5、按照以下顺序做好转印三明治结构:
负极(阴极)
海绵
滤纸
凝胶
转印膜
滤纸
海绵
正极(阳极)
注:① 要彻底清除三明治结构中的气泡,适当补加 1×快速转膜液保持三明治结构湿润。
② 三明治结构太紧和太松都会影响转印效果。如果太紧,可以去除阳极一侧的海绵或滤纸。
6、将三明治结构放于转移槽中,转印槽中灌满1×快速转膜液。
7、湿转推荐使用恒流转移:
二、半干转(Semi-dry blot):
1、按照下表配制 1×快速转膜液:
2、将滤纸和海绵浸泡在 1×快速转膜液中,完全浸湿。
3、PVDF膜使用前要用无水甲醇润湿30秒,随后浸泡在1×快速转膜液中,完全浸湿,平衡 5
分钟。
4、将凝胶在超纯水中浸泡漂洗 2 分钟,去除胶表面的SDS;随后将凝胶浸泡在 1×快速
转膜液中。
注:水中漂洗时间一定不能超过 2 分钟,否则分子量较大的蛋白不能完全转移。
5、按照以下顺序做好转印三明治结构:
负极(阴极)
下层滤纸
凝胶
转印膜
上层滤纸
正极(阳极)
半干转时,滤纸、胶、膜之间的大小,一般是下层滤纸≥膜≥胶≥上层滤纸。上下两层
滤纸一定不能接触;滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡。接触的滤纸和气泡会造成短路。
6、半干转推荐使用恒压转移: 25 V,10-20 分钟。
问题解决:
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
4℃贮存,一年有效。常温运输。