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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
27
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔脑动脉血管内皮细胞 | T25瓶 | LZ-YX10466 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| NCI-H596细胞,人肺腺鳞癌细胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLV/3T3细胞 CM-R079大鼠冠状动脉平滑肌细胞完全培养基100mL | 幼蚊细胞;C6/36 |
| 人脊髓星形胶质细胞cDNAHA-sp cDNA | phospho-alpha B Crystallin (Ser19): 0酸化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 0.1ml |
| CL-0173NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh CENPT 着丝粒蛋白T抗体 规格 0.2ml |
| 豚鼠皮肤细胞;GP-S3 非洲绿猴肾细胞,CV-1细胞 SMC细胞,兔主动脉平滑肌细胞 | NE ELISA Kit 大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶Multi-class antibodies规格: 48T |
| hMNC-PB-c single donorula-pure 外周血来源的人类单核细胞 人髓核细胞HNPC | GRB2: 生长因子受体结合蛋白2抗体 0.1ml |
| HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) | PCDHA7: 原钙粘附蛋白α7抗体 0.2ml |
| EC9706人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS | Anti-Nogo-B/A /FITC 荧光素标记轴索过度生长抑制因子-B/A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| CEACAM1 Others Human 人 CEACAM1 / CD66a 人细胞裂解液 (阳性对照) | HBeAb 乙型肝炎e抗体 96T |
| 人上皮细胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌细胞完全培养基 100mL | Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser212) 0酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体 规格 0.1ml |
| IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) | Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch样蛋白14抗体 规格 0.2ml |
| ERBB2 Others Mouse 小鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 人细胞裂解液 (阳性对照) | Gax(growth arrest-specific homeobox) 生长终止特异性同源盒基因抗原 0.5mg |
| tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1 | Angiotensin II Type 2 Receptor: 血管紧张素Ⅱ2型受体相互作用蛋白抗体 0.1ml |
| 兔脑动脉血管内皮细胞STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | Goat Anti-bovine IgG/Gold 金标记羊抗IgG(10/15nm)Multi-class antibodies规格: 0.5ml |
| 人脑干星形胶质细胞HA-bs | Anti-RICTOR 雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| SLC3A2 Others Rat 大鼠 SLC3A2 / CD98 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-IL-6/FITC (mouse、rat) 荧光素标记白介素6抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
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