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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
唾液弯曲杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据唾液弯曲杆菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。
规格及成分:
编号 成分 规格
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 唾液弯曲杆菌染料法PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 唾液弯曲杆菌染料法PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
| 试剂五 | DNA 病毒裂解液(试用装) | 15 次(9 mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:
DNA 模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
使用方法 一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6 个 10倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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文献和实验),样本上样量不超过提取试剂盒说明书规定的上限,一般提取的 RNA 质量都是很好的。 ③除此之外,提取的过程中戴一次性干净手套;在单独洁净的区域操作;戴口罩并在操作过程中避免讲话。可有效防止实验者汗液、唾液中的 RNase 污染。 (2)该基因第一次扩增,其 CT 值偏大,而其余基因的 CT 值正常。 这种情况下就需要判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大,还是基因本身的表达量低造成的 CT 值偏大。 如何判定是因为基因的扩增效率低导致的 CT 值偏大,还是基因本身的表达量低造成的 CT
,不靠壁,不贴液面。 混匀平均分装的注意事项: 1、第一管吸液前需要先把枪头在液面中浸润一下,以保证三复孔的枪头吸液量是差不多的。 2、用混匀器进行混匀,不要用移液器吹打。 详细说明书 transhold cat. A2010A0112荧光定量PCR Premix试剂盒(荧光染料) (FQ
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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