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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
39
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔腹腔巨噬细胞 | T25瓶 | LZ-YX10361 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞;M619 | WISH细胞,人羊膜细胞 普通变形杆菌 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 |
| NCI-H838细胞,人非小细胞肺癌细胞 大鼠正常肝细胞,BRL-3A细胞 CM-R055大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基100mL | RASSF6: RAS家族关联结构域蛋白6抗体 0.2ml |
| 人齿根膜韧带成纤维细胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus | Anti-HDAC8 /FITC 荧光素标记组蛋白去乙酰化酶8抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 | p2(Human myelin protein 2) ELISA Kit 人神经髓鞘蛋白 96T |
| 人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480] | Rhesus antibody Rh PYGL 肝糖原0酸化酶抗体 规格 0.2ml |
| 人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1 | C17orf74: 17号染色体开放阅读框74抗体 0.2ml |
| CL-0096HCT 116(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh BRCC3/BRCC36 癌易感基因复合物亚基蛋白3抗体 规格 0.2ml |
| 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1 | Fbg(Mouse Fibrinogen) ELISA Kit 小鼠血纤蛋白原Multi-class antibodies规格: 48T |
| CM-R014大鼠气管和支气管上皮细胞完全培养基100mL | ESAM: 内皮细胞粘附分子抗体 0.1ml |
| 人胰腺星状细胞完全培养基 100mL | Anti-LRRK2 富亮氨酸重复激酶2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 人二倍体细胞;HEL | Anti-Phospho-Connexin 43 (Ser368) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠等0酸化Connexin 43蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 狗肺成纤维样细胞;DogL1 非洲绿猴肾细胞,VERO C1008细胞 N/N1003A(RLE)细胞,兔晶体上皮细胞永生系 | AIPL1: 遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体 0.1ml |
| 兔腹腔巨噬细胞绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞;MFC-GFP | 第八因子相关抗原抗体 Anti-factor VIII 0.1ml |
| GBC-SD, 人胆囊癌细胞 猴肾细胞,HepII细胞 TE 354.T(人皮肤基底细胞癌) | Rhesus antibody Rh GRP 促胃泌素释放肽抗体 规格 0.2ml |
| CXCL9 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白 | IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗大鼠IgM 0.1ml |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞, 有如下几个问题需要和大家讨论,望经验丰富的同志指点一二。 1. 关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物, 是不是注射后有两大特点:第一,得到的细胞更多, 第二,得到的细胞都是炎性巨噬细胞, 而未注射则是非炎性细胞? 我做了十来次, 有时注射有时不注射(淀粉肉汤), 注射后细胞确实多一些。 至于炎性与非炎性,有待指教。 2. 关于分离的巨噬细胞的纯度问题。 我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。 一开始纯化完铺板, 基本上看不到
目的要求 1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程 基本原理 细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合
实验材料: 1. 肺泡巨噬细胞来源:体重为2—3kg的成年兔。也可使用成年大鼠; 2. 灌洗液:不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.4; 3. 培养液:MEM培养液,添加谷氨酰胺1mmol/L、卡那霉素100µg/ml、青霉素200IU/ml、链霉素200µg/ml、HEPES 10mmol/L和10%胎牛血清; 4. 无菌手术器械:手术刀、解剖剪、解剖镊、止血
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