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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
新德里超级细菌染料法荧光定量PCR试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海酶联生物科技有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
50次
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据新德里超级细菌保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品由酶联生物提供,不得用于临床诊断。

规格及成分:
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 2×qPCR MagicMix | 500 μL(棕色管) |
| 试剂二 | 荧光 PCR 专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖) |
| 试剂三 | 新德里超级细菌染料法PCR 引物混合液 | 100 μL(白盖) |
| 试剂四 | 新德里超级细菌染料法PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 50 μL(红盖) |
| 试剂五 | DNA 病毒裂解液(试用装) | 15 次(9 mL) |
| 使用手册 | 1 份 |
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:
DNA 模板、10×ROX(根据机型决定,具体见使用方法)。
样品 DNA 的制备:
如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 上步制备的 PCR 阳性对照的第 4号(浓度为 1×10E4 拷贝/μL,10μL 相当于 1 万拷贝)或第 5 号(浓度为 1×10E5拷贝/μL,10μL 相当于 10 万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为 PC。另外用水作为 NC。如果每次制备需要 200μL 样品,则 PC 和 NC 的体积也必须是 200μL。
用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。本试剂盒免费赠送 15 次一管式病毒 DNAout。
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文献和实验实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
,当 ROX 的荧光信号很低且趋近于零时,则将导致计算异常。当我们在参比荧光设置处将 ROX 改为 None 后重新分析结果则可以得到正常,漂亮的扩增图谱了(图 7C,7D)。 图 7 参比荧光选择错误导致扩增曲线异常 Part 4:Run Method 反应程序设置 定义好了布板信息后,接下来我们就进入了反应程序设置环节。此时我们需要结合所用试剂推荐的反应程序和引物 Tm 值等信息对反应程序进行不断摸索和逐步优化,旨在得到特异性强,灵敏度高的最佳反应程序。 在这里需要提醒大家的是一定不要忘记进行荧
光染料可以作为你初步的选择对象。老实说,荧光染料法实质上无非就是常规的PCR反应中添加了荧光染料,借助染料和双链DNA的结合所发出的荧光实时监控反应的进程。由于不需要设计序列特异性探针和优化反应条件,价格低廉,通用性强,而且荧光染料法可用于任何一种型号的定量PCR仪,因而同样得到广泛采用。荧光染料法的专一性和PCR没有本质的区别---但是作为“失之毫厘,谬之千里”高度精确的实验,你依然可以选择更好的荧光染料、更严谨专一的PCR酶、更好的缓冲体系来提高反应的可靠程度。 在荧光染料法的定量PCR反应试剂中
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