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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 大鼠羊膜间充质干细胞 | T25瓶 | LZ-YX10125 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人细胞裂解液 (阳性对照) | 小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH2 |
| 人癌细胞;MDA-MB-468 | 细胞膜调控蛋白Paralemmin 1抗体 |
| 人口腔表皮样癌细胞;KB | AKT相互作用蛋白蛋白抗体 |
| JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM2 / CD322 / VE-JAM 人细胞裂解液 (阳性对照) | 胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体 |
| EPHA7 Others Human 人 EphA7 / EHK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) | 电压依赖性钙通道CACNA1G+CACNA1H抗体 |
| AtT-20小鼠垂体瘤细胞 AtT-20 mouse pituitary tumor cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 酸化原活化蛋白激酶激酶1抗体 |
| TNFRSF1B Others Human 人 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) | 1号染色体开放阅读框57抗体 |
| PAPPA2 Others Human 人 PAPPA2 / Pappalysin 2 人细胞裂解液 (阳性对照) | 胃泌素抑制肽抗体 |
| ACHE Others Mouse 小鼠 AcetylCHOlinesterase / ACHE 人细胞裂解液 (阳性对照) | 嗜乳脂蛋白样8抗体 |
| FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照) | 一氧合成酶-3(内皮型)抗体 |
| HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) | 吞噬细胞运动蛋白2抗体 |
| CM-R108大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基100mL | 热休克蛋白相关蛋白4抗体 |
| 大鼠羊膜间充质干细胞CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照) | 2号染色体开放阅读框49抗体 |
| 人肺间充质干细胞裂解物HPMSCL | 脑特异性0脂酸酸酶样蛋白1抗体 |
| IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照) | 凋亡加强结构域蛋白4抗体 |
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
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文献和实验一、细胞复苏和接种 1. 37℃预热大鼠间充质干细胞培养液(RM-001)和基础培养液(RM-001B)。 2. 从液氮中取出细胞产品管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 3. 在生物安全柜中,用75%的酒精擦拭产品管外壁。 4. 将产品管中的细胞移至15 ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液(RM-001B)4-5ml混匀,边滴加边摇匀。 5. 用1ml基础培养液(RM-001B)冲洗
细胞产品因为其特殊生物活性,在购买过程中受到诸多因素影响,产品质量极其容易波动,甚至出现意外情况,诸如细胞死亡,活性降低,不生长等,其中人为主观因素和环境客观因素均非常重要。需要客户和商家做好有效细致的沟通。 一、购买前: 1、明确产品需求 细胞用户在购买细胞前,首先要非常清晰明确自己对产品的需求,细节如下: (1)细胞中文全称,包含物种来源,组织来源等。(不仔细看就会浪费自己的时间哦!) 比如:SD 大鼠骨髓间充质干细胞,「SD
) mimics,经检测在人类、小鼠、大鼠中均无同源片段,最大限度降低了对定量实验造成的干扰,适用于内参表达不稳定的外泌体或暂未发现合适内参的其他样品,对目的 microRNA 进行相对定量。外参序列:ucaccggguguaaaucagcuug。cel-miR-39-3p外参正序列为 AACACGCTCACCGGGTGTAA。 18、外泌体专用培养基是否可用于重悬、接种以及继续培养细胞? A:不可以。外泌体专用培养基不含促细胞贴壁的因子,可以维持已贴壁的细胞一定时间内的生长,无法替代完全培养基长期
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